不同浓度腐胺对人血管内皮细胞、皮肤成纤维细胞及肝细胞生物行为的影响-烧伤外科专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 目 录 中文摘要 1 英文摘要 4 中英文对照缩略词表 12 前言 13 第一部分不同浓度腐胺对人血管内皮细胞增殖、迁移及凋亡的影响 15 一、材料与方法 15 二、结果 21 三、讨论 24 四、小结 26 第二部分不同浓度腐胺对人皮肤成纤维细胞增殖、迁移及凋亡的影响 27 一、材料与方法 27 二、结果 30 三、讨论 33 四、小结 35 第三部分不同浓度腐胺对人肝细胞增殖及凋亡的影响 36 一、材料与方法 36 二、结果 38 三、讨论 41 四、小结 42 全文总结 43 参考文献 44 综述 48 致谢 56 学位论文原创性声明 57 学位论文知识产权权属声明 57 关于学位论文使用授权的说明 57 中文摘要 中文摘要 不同浓度腐胺对人血管内皮细胞、皮肤成纤维细胞 及肝细胞生物行为的影响 研究生：陈健霞 导 师：荣新洲 教授 中文摘要 目的 研究不同浓度腐胺对人血管内皮细胞（ human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）及皮肤成纤维细胞（human skin fibroblast,HSF）两创面修复细胞增 殖、迁移及凋亡等细胞生物学功能的影响，探讨不同浓度腐胺对创面愈合的影响。 研究不同浓度腐胺对人肝细胞增殖及凋亡的影响。 方法 1.研究腐胺浓度分别为 0、0.5、1、5、10、50、100、500、1000、5000μg/ml 培养人血管内皮细胞 24h，100 倍光学显微镜下观察各浓度组细胞形态变化，设 定研究浓度区间。 2.利用 MTS 增殖试验，检测上述设定的腐胺浓度区间培养的血管内皮细胞、 皮肤成纤维细胞及肝细胞 24h 后的增殖情况。 3.利用 Transwell 小室细胞迁移实验检测上述设定的腐胺浓度区间培养的血 管内皮细胞及皮肤成纤维细胞 24h 后迁移能力变化。 4.利用流式细胞仪检测上述设定的腐胺浓度区间培养的血管内皮细胞、皮肤 成纤维细胞及人肝细胞 24h 后细胞凋亡变化情况。 结果 1.500μg/ml 浓度腐胺组 HUVEC 细胞形态无明显改变，1000μg/ml 腐胺组细 胞出现贴壁减少，细胞变小、变圆，5000μg/ml 腐胺组细胞漂浮、碎片状。 2.MTS 结果显示，（1）0.5、1、5、10μg/ml 腐胺组 HUVEC 的吸光度值与 对照组（0.447±0.021）比较呈显著升高（P 值均小于 0.05），且浓度为 1μg/ml 时达峰值（0.857±0.031）；50、100μg/ml 腐胺组 HUVEC 吸光度值与对照组比 1 广州医科大学硕士学位论文 广州医科大学硕士学位论文 较无差异（P 值均大于 0.05）；500、1000μg/ml 腐胺组 HUVEC 吸光度值较对照 组显著降低（P 值均小于 0.01）。（2）0.5、1、5、10μg/ml 腐胺组 HSF 的吸光 度值较对照组（0.439±0.013）升高（P 值均小于 0.01），并且 1μg/ml 时达峰值 （0.754±0.024）；50、100μg/ml 腐胺组 HSF 的吸光度值与对照组无明显差异（P 值均大于 0.05）；500、1000μg/ml 腐胺组 HSF 吸光度值较对照组降低（P 值均 小于 0.01）。（3）0.5、1、5、10μg/ml 腐胺组人肝细胞吸光度值均较对照组 （0.455±0.021）升高(P 值均小于 0.05)，并且 1μg/ml 时达到峰值（0.831±0.016）； 50μg/ml 腐胺组 LO2 细胞吸光度值与对照组无差异（P 值均大于 0.05）；100、 500、1000μg/ml 及以上浓度腐胺组肝细胞吸光度值较对照组降低(P 值均小于 0.01)。 3.Transwell 迁移实验结果显示，（1）1、5、10μg/ml 腐胺组 HUVEC 穿过微 孔膜细胞数目较对照组（168±26）显著增多（P 值均小于 0.01），并且 1μg/ml 时穿过微孔膜细胞数达到峰值（336±19）；0.5、50、100μg/ml 腐胺组穿过微孔 膜细胞数与对照组比较无差异（P 值均大于 0.05）；500、1000μg/ml 腐胺组穿过 微孔膜细胞数较对照组减少（P 值均小于 0.05）。（2）1μg/ml 腐胺组 HSF 穿过 微孔膜的细胞数目较对照组（253±19）显著增加（P 值均小于 0.01），且达到峰 值（309±21）；0.5、5、10μg/ml 腐胺组 HSF 穿过微孔膜的细胞数目与对照组无 明显差异（P 值均大于 0.05）；50μg/ml 及以上浓度腐胺组 HSF 穿过微孔膜的数 目较对照组减少（P 值均小于 0.05）。 4.流式细胞凋亡结果显示，（1）0.50、1、5、10μg/