不同抗螨性能东方蜜蜂obp3基因的克隆与表达变化规律的研究-动物遗传育种与繁殖专业论文.docxVIP

il uarhuntlAuci rg A ytisrevi n U rets a  MeerngoieietDat ressi D si s yl an A gnino l C dnsael unRoi sserfpox E seg nah C f3opbo f o si paAnaresCui ci r baF ththtniewreffi D egtinitmsi se R yt re por P et a udargts o P gna Yne h C rot u T f noerhPS- ni L u Y : ytil ai ce pS l a mi n A cit eGne g ni deBer noidtcnauauaudorRpe : noitceri  Dnoit cet or P  dnoait aziUlit  fcioiot eGnesecr uoRse , e n Ju 2013 ,i ef e H, nnhiAauhi .C.RP 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他 人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得安徽农业大学或其它教育机构 的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均 己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 研究生签名:节点伤 时[同: 2?J 尹 j月 j 日 关于论文使用授权的说明 本人完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即:学校有权 保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或 扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意安徽农业大学可以用不同方式在不问 媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。 (保密的学位论文在解密后应遵守此协议) 研究生签名:博场 时间:tβ 年 6月/日 …签名:切支 时间: 沪{ 1 年 b Fl{ [1 摘要 本文旨在分析不同抗螨特性的东方蜜蜂的 obp3 基因的全序列的差异以及 obp3 基因在不同抗螨性能东方蜜蜂中时空表达变化规律，以寻找 obp3 基因与蜜蜂抗螨 性能的相关性，并制备东方蜜3P蜂BO 多克隆抗体，为后续研究提供材料。 .根I B据CN 基因A的NDc 数据库中西方蜜蜂sa（rpeifAill e m 序列设计引物，以东方蜜A蜂NDc L.）obnpat 3（odonrg ndbii ni e otpr 3） 为模板克隆并测序获得 obpN3Dc A 基因全序列。结果显示，东方蜜蜂蜂螨易感组和抗螨组除在 192 位点存在t/ c （F/ L ） 的有义突变外,在 164 位点存在g/ a ，200 位点存在a/ g ，341 位点存在a g/ 的无义突 变；西方蜜蜂与东方蜜蜂螨组相比，前者5在3 51- 位点存在三个碱基gac 的缺失使 得其编码的氨基酸缺少一个谷氨酰胺（Q），在 159，161, 201,217,231,234,235,318,321, 348,364,367,372,374,45, )2L位/I 点g/(存,a) 在L/I着( c/ a a) D/ G( a ,g) /L/ M(t/ a ) N/ D( a ,g)/D/ N g/(g)/,(a,a) S/ T g/( ,c) T/ V( a/ ,g L( c/ ,t)  V/ L g/( ,c) R/ K  ) S/ R( c/ a 的有义突变,体现了两者在物种上的差别。 .对不同抗螨性能东方蜜蜂 obp3 基因进行荧光定量RCP 检测，结果表明 obp3 基因 在抗螨组腹部与头部表达量最高，同时与螨易感组在头部与腹部的表达量差异显 著，对东方蜜蜂螨易感组不同日龄 obp3 基因表达量的荧光定量CP R 检测结果表明， 抗螨组的东方蜜蜂 obp3 基因在头部与腹部的表达量大体趋势是随日龄增长而增加。 东方蜜蜂 obp3 基因全序列测序结果与时空表达变化研究结果共同表明，抗螨组东 方蜜蜂的 obp3 基因与螨易感组东方蜜蜂的 obp3 基因不仅在序列上有碱基突变导致 的蛋白质变异，并且在 obp3 基因表达量上差异也很明显，这两点共同说明了 obp3 基因对东方蜜蜂抗螨性能有影响。 示显果结析分学息信3物. 生 3P BO有共白蛋为式子分，酸1基48氨个 C766 H1221 N2为05 O235 S分16 ，子量 为 电1点7575理.3，论等 为 衰期 4.9估4，计半 30h。 蛋白，3P不B稳O 定指蛋数白为属于不稳定 40.94，脂肪指数为 89.53，亲水指数为