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扶桑组织培养研究 　　摘要: 以茎段为材料, 研究重瓣扶桑的组培快繁技术。结果表明, 以0.1%的升汞灭菌10min, 接种到WPM+6- BA1.0+KT1.0+GA1.0+蔗糖2.5%培养基上,对初代培养有较好的效果, 腋芽诱导率为90%; 继代增殖则以WPM+6- BA1.5+Ad4+GA0.4+Fe2+6.9 较佳,增殖倍数为3.5。 　　关键词: 扶桑; 组织培养; 快速繁殖 　　 　　扶桑（ H ibiscus rosa-sinensis L.）为锦葵科木槿属多年生常绿灌木，又名佛桑、朱槿、大红花。叶为卵形或广卵形，花着生于上部叶腋，花冠较大呈漏斗状，花心细长，有单瓣品种与重瓣变种，花色多并且花期很长，历来受人们的喜爱，属名贵的观花观叶植物。在南方主要作为园林布景，在北方主要作观赏盆栽；同时也是良好的中药材料与制菜原料。 　　扶桑因花不能结实，难以用种子繁殖，现阶段主要采用扦插繁殖，但由于扶桑的生长受自然环境条件影响大，以致生根缓慢，繁殖系数低，同时扦插的苗木也容易受病虫危害的影响而降低观赏价值，尤其是重瓣变种的观赏价值较高的品种。组织培养进行繁殖不受自然条件影响，可以在短期内获得大量无菌苗木，并有效地提高苗木质量，节约成本。谢晓蓉[1]等通过愈伤组织培养并诱导出苗，大大提高繁殖系数。由于愈伤组织培养存在变异可能性，本文主要是研究直接从新生茎段诱导出芽，研究扶桑组培快繁技术。 　　 　　1 材料与方法 　　 　　1.1 材料及预处理 　　材料为重瓣扶桑茎段。先用自来水冲洗，并用洗衣粉水浸泡5m in，再用自来水冲洗干净，接着用75% 的酒精灭菌40~60s，在0.1% 的升汞溶液中浸泡适当时间，用无菌水漂洗4~5 次，在无菌操作台上把材料切成3~4cm 长的茎段，接种在培养基中。 　　 　　1.2 方法 　　1.2.1 消毒时间对外植体的影响。用0.1% 的升汞溶液， 采用不同的时间（ 6m in、8m in、10m in、12m in）消毒处理，重复4 次，10 天后观察外植体污染率与诱导率的情况，通过方差分析寻找比较好的消毒时间。 　　1.2.2 基本培养基对启动培养的影响。把材料接种在1/2M S、W PM 两种基本培养基上，其它激素配比一致情况下，7 天后观察，分析两种基本培养基对茎段发芽率的影响。 　　1.2.3 不同因素水平组合对启动培养的影响。采用L9 （ 34）正交设计表，因素组合分别为6-BA（ 0.5m g/L,1.0m g/L,1.5m g/L）、K（ 0.5m g/L, 1.0m g/L,1.5m g/L），G（ 0.5m g/L, 0.75m g/L, 1.0m g/L）,蔗糖（ 2.5% ,3.0% ,3.5% ），接种7 天后统计萌芽率，寻找对扶桑启动培养的较优组合。 　　1.2.4 不同因素水平组合对增殖的影响。采用L9（34） 正交设计表， 因素组合分别为6-BA（0.5m g/L,1.0m g/L,1.5m g/L）、G（ 0.3m g/L, 0.4m g/L,0.5m g/L）、A d（ 2.0m g/L, 3.0m g/L, 4.0m g/L）、Fe2+(6.9m g/L,13.9m g/L,27.8m g/L), 蔗糖2.5% , 接种15天后统计增殖率，寻求扶桑继代培养较优组合。 　　 　　2 结果分析 　　 　　2.1 灭菌时间对材料的影响 　　2.1.1 污染情况。不同时间消毒处理污染率结果见表1，经反正弦数据代换并进行方差分析与最小显著极差法测验（LSR 法），结果表明0.1% 的升汞处理10~12m in 污染率较低，并与6m in、8m in处理存在极显著差异。 　　2.1.2 各种材料死亡情况分析。不同消毒时间处理材料的死亡率结果见表2，经反正弦数据代换并进行方差分析与最小显著极差法测验（ LSR法），结果表明0.1% 的升汞处理6~10m in 材料死亡率较低，与12m in 处理差异达极显著水平。综合表1 与表2 结果，可以得出在采用0.1% 升汞消毒扶桑材料时，10m in 处理为最佳选择。 　　 　　 　　2.2 基本培养基对萌芽率的影响 　　不同基本培养基对扶桑萌芽率的影响，结果见表3 ，表明基本培养基W PM 对萌芽率有比较好的效果，相同激素情况下W PM 萌芽率总是高于1/2M S。 　　 　　 　　2.3 不同因素水平组合对启动培养的影响 　　利用L9 （34）正交表，研究6-BA 、K T、G A 、蔗糖对启动培养的影响，重复3 次，7 天后统计萌芽率，极差法分析表明在扶桑的启动培养中，对其萌芽率影响的大小因素顺序是：6-BA ＞蔗糖＞G A ＞K T，方差分析见表4,区组间差异不