快速获得果蝇唾腺体技巧和方法.docVIP

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快速获得果蝇唾腺体技巧和方法

快速获得果蝇唾腺体技巧和方法   摘 要:解剖了三龄幼虫,获取唾腺体是果蝇唾腺染色体制片和观察的第一步。在长期的实验准备中,虽提供大量的三龄幼虫,但在解剖幼虫时因切入点不精确,且操作工具不当,最后较难得到理想的唾腺体,影响后期唾腺的染色体制片和观察。经过大量的实验,对解剖幼虫时的切入点和操作工具以及操作角度进行探索和改进。最终证明,改进后的方法不但能够节约时间,节省材料,而且能够快速地获得完整的唾腺体,大大提高染色体制片和观察的效果。   关键词:果蝇唾腺;解剖技巧;遗传学实验   中图分类号 Q963 文献标识码 A 文章编号 1007-7731(2017)21-0039-03   Skills and Methods of Quickly Getting Drosophila melanogaster Salivary Glands   Zhou Zhihua   (College of Life Sciences,Fujian Normal University,Fuzhou 350108,China)   Abstract:Anatomy of third-instar larvae,obtaining salivary glands,is the first step in the preparation and observation of the Drosophila salivary gland chromosomes. In the long-term experimental preparation,although a large number of third-instar larvae are provided,inaccuracies in the dissection of larvae and inaccurate handling tools make it harder to obtain ideal salivary glands,chromosomal preparations that affect later salivary glands and observed. After a large number of experiments,the larvae dissecting points and operating tools and operating point of exploration and improvement. Ultimately,the improved method not only saves time,saves materials,but also obtains the complete salivary gland quickly and greatly improves the effect of chromosome preparation and observation.   Key words:Salivary gland;Anatomy techniques;Genetics experiment   双翅目昆虫果蝇饲养条件简单,费用低廉,且繁殖能力极强。因自身的这些特点和优势,成为生物遗传学实验的模型得到广泛的应用[1]。而果蝇幼虫的唾腺染色体长可达2mm,宽5μm,比其他细胞中期时的染色体长约150倍,被称为巨大多线染色体。这巨大多线染色体不仅是研究间期染色体的典型材料,而且在基因的复制、转录以及表达调控上也是一个很直观的模型,并且对各种神经疾病及肥胖、糖尿病等的研究也是个很好的材料[2-3]。在生物实验里,唾腺染色体的制备和观察是实验课里的重要内容之一。许多实验教材和文献都对该实验进行了很详细的介绍[4-5]。果蝇唾腺染色体的制片和观察分为:解剖幼虫、获取唾腺体、染色、压片和观察等几个步骤。一些教材和文献介绍了对唾腺的染色体的识别[6],也有很多的教材和文献对染色体的制片做了很多的改进,但对幼虫唾腺的剖取、脂肪体的剥离具体操作却很少报道或者简单的描述[7-11]。根据长期做遗传学实验教学辅助的经验来看,按照实验教材上及文献上的一些方法,对于初次操作者剖取唾腺是一个很大的挑战,成功率较低,使后续实验没法展开。为了提高学生的制片和观察效果,通过长期的实验经验和方法探索,在实验操作上进行了一些改良,取得了较好的效果,能高效高质量地完成唾腺染色体制备和观察。   1 材料与方法   1.1 材料和试剂 果蝇三龄幼虫,蒸馏水。   1.2 仪器和器具 解剖镜,眼科镊、解剖针、大头针。   1.3 具体操作方法 (1)将生长肥大的三龄幼虫放置在滴有蒸馏水的载玻片上,在解剖镜下观察幼虫的两端,黑色的一端是幼虫头部

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