04第四章节药物定量分析跟分析方法验证.pptVIP

日本和英国生物学家共同获得诺贝尔生理学或医学奖 近年诺贝尔生理学或医学奖 得主及其主要成就 2011年，美国科学家布鲁斯·博伊特勒、法国科学家朱尔斯·霍夫曼和加拿大科学家拉尔夫·斯坦曼。他们发现了免疫系统激活的关键原理，这使人们对人体免疫系统的认识有了革命性的改变。 2010年，英国生理学家罗伯特·爱德华兹。他在体外受精技术领域做出的开创性贡献。 2009年，美国科学家伊丽莎白·布莱克本、卡萝尔·格雷德和杰克·绍斯塔克。他们解决了一个生物学的重要课题，即染色体在细胞分裂过程中是怎样实现完全复制，同时染色体如何受到保护而不至于发生降解。 两位美国科学家分享2012年诺贝尔化学奖 美国科学家罗伯特J·勒夫科维兹(Robert J. Lefkowitz)与科学家布莱恩·K·卡比尔卡(Brian K. Kobilka)因在G蛋白偶联受体方面的研究获得2012年诺贝尔化学奖。 人物介绍 罗伯特J·勒夫科维兹，1943年04月15日出生在纽约，毕业于哈佛大学，研究领域为受体生物学与生物化学，目前在杜克大学任职，在霍华德·休斯医学研究所从事研究工作。2007年获得美国国家科学奖章。 布莱恩·科比尔卡，1955年出生，美国斯坦福大学医学院教授，分子细胞生理学和医学部博士。他是ConfometRx(一家专注于G-蛋白偶联受体的生物技术公司)的共同创办人。他在2011年成为美国国家科学院院士。 G蛋白偶联受体是一种与三聚体G蛋白偶联的细胞表面受体。含有7个穿膜区，是迄今发现的最大的受体超家族，其成员有1000多个。与配体结合后通过激活所偶联的G蛋白，启动不同的信号转导通路并导致各种生物效应。 近年诺贝尔化学奖得主及其主要成就回顾 2011年，以色列科学家达尼埃尔·谢赫特曼因发现准晶体而获奖。准晶体是一种介于晶体和非晶体之间的固体，准晶体的发现不仅改变了人们对固体物质结构的原有认识，由此带来的相关研究成果也广泛应用于材料学、生物学等多种有助于人类生产、生活的领域。 2010年，美国科学家理查德·赫克与日本科学家根岸荣一和铃木章因在有机合成领域中钯催化交叉偶联反应方面的卓越研究成果而获奖。这一成果广泛应用于制药、电子工业和先进材料等领域，可以使人类造出复杂的有机分子。 2009年，英国科学家文卡特拉曼·拉马克里希南、美国科学家托马斯·施泰茨和以色列科学家阿达·约纳特因对“核糖体的结构和功能”研究的贡献而获奖。 生物样品包括各种体液和组织，但实际上最常用的是比 较容易得到的血液（血浆、血清、全血）尿液、唾液。 血样: 血浆（plasma）和血清（serum）是最常用的生物样品。 唾液: 尿液: 一、常用样品的种类、采集和储贮藏 （一）去除蛋白质 1．加入与水相混溶的有机溶剂 2．加入中性盐 3．加入强酸 4．加入含锌盐及铜盐的沉淀剂:与Pr羧酸 5．酶解法 （二）缀合物的水解 （三）有机破坏：金属离子---消解剂 （四）分离、纯化与浓集 1．液-液萃取法（liquid-liquid extraction , LLE） 2．液-固萃取法（liquid –solid extraction, LSE） 3．被测组分的浓集 二、生物样品分析前处理技术 （五）??? 化学衍生化 1．GC中化学衍生化法 2．HPLC中化学衍生化法 三、定量分析方法的验证 ----------生物样品分析 （一）特异性 内源性物质不得干扰原药、代谢物 （二）标准曲线 r≥0.9900，至少5个浓度，不许外延 （三）精密度和准确度 批内和批间RSD≤15％、20％ 相对回收率85～115％（80～120％） （四）最低定量限LOQ 3～5倍t1/2，或1/10～1/20倍Cmax （五）样品稳定性 室温、冻融、长期冰冻 （六）提取回收率（绝对回收率） 一般低于100％，须稳定 （七）质控样品 已知浓度样品均匀放入待测生物样品序列中，以确保定量测定的准确度 定量分析方法的验证 ----------生物样品分析 样品 固相净化 及 反相高效液相色谱法测定血浆中茶碱 伍朝筼等 药学学报,1989,24(10):769~773 净化前空白血浆 净化后空白血浆 血浆样品 方法：Column Zorbax C18 5μm 2.5cm?4.6mm 254nm Precolumn YWG-ODS 9-11μm 5?4.6mm Mobile Phase:甲醇-醋酸钠(0.05mol/L pH3.0)50?50 12