肿瘤相关巨噬细胞促进宫颈癌淋巴管生成的机制分析-mechanism analysis of tumor-associated macrophages promoting lymphangiogenesis in cervical cancer.docxVIP

华 华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 PAGE 10 PAGE 10 中英文缩略词表 缩略语 ANOVA 英文全称 analysis of variance 中文全称 方差分析 cDNA complementary deoxyribonucleic acid 互补脱氧核糖核酸 CIN cervical intraepithelial neoplasms 宫颈上皮内瘤变 DAPI 4,6-diamidino-2-phenylindole 4,6-二脒基-2-苯基吲哚 DEPC diethyl pryocarbonate 焦碳酸二乙酯 DMSO dimethylsulfoxide 二甲基亚砜 ECM extracellular matrix 细胞外基质 ECM Endothelial Cell Medium 上皮细胞培养基 ELISA enzyme linked immunosorbent assay 酶联免疫吸附实验 IHC immunohistochemistry 免疫组织化学 LPS lipopolysaccharide 脂多糖 LVD lymphatic vessel density 淋巴管密度 LYVE-1 MD lymphatic vessel endothelial HA receptor-1 macrophage density 淋巴管内皮透明质酸受 体- 1 巨噬细胞密度 MMPs matrix metallo proteinases 基质金属蛋白酶 NSCLSC nonsmall-cell lung cancer 非小细胞肺癌 PBS Phosphate Buffer Saline 磷酸盐缓冲溶液 PMA Phorbol-12- myristate-13-acetate 佛波酯 RT-PCR reverse transcription polymerase chain reaction 逆转录聚合酶链技术 TAMs tumor-associated macrophages 肿瘤相关巨噬细胞 VEGF vascular endothelial growth factor 血管内皮细胞生长因子 VEGFR-3 vascular endothelial growth factor receptor-3 血管内皮生长因子受体 -3 肿瘤相关巨噬细胞促进宫颈癌淋巴管生成的机制研究 中文摘要 第一部分 宫颈癌组织中巨噬细胞的存在及其分布特点 目的 探讨肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages，TAMs）在宫颈癌组 织中的存在及其分布特点。 方法 免疫组化双染法检测 61 例早期宫颈浸润癌标本，27 例 CIN 标本和 29 例正 常宫颈标本中 CD68 阳性的巨噬细胞和 D2-40 阳性的微淋巴管的存在和分布，并 对宫颈癌中巨噬细胞的分布与临床病理特征间进行分析。 结果 1. 巨噬细胞在宫颈癌癌巢中的数量明显多于在正常宫颈组织的数量 （P0.05）。在癌间质中的数量明显多于在正常宫颈组织和 CIN 组织中的数量（P 均0.05），而在癌周或癌旁中的数量和正常宫颈组织相比无明显差异（P0.05）。 2. 微淋巴管在宫颈癌组织中主要位于癌间质和癌周，而在癌巢区罕见。微 淋巴管在癌间质中的分布明显高于正常宫颈组织和 CIN 组织（P 均0.05）。 对巨噬细胞密度（macrophage density，MD）和微淋巴管密度（lymphatic vessel density， LVD）的 Pearson 相关分析发现癌间质中的 TAMs 和癌间质中的 LVD（P=0.0002），以及癌间质中的 TAMs 和癌周的 LVD 存在显著正相关 （P=0.0322）。在癌巢 TAMs 和癌间质 LVD，癌周 TAMs 和癌周 LVD，或癌旁 TAMs 和癌旁 LVD 间未发现明显相关性（P0.05）。 4. 有淋巴转移的宫颈癌患者癌间质 MD 水平显著高于无淋巴转移的宫颈癌 患者的癌间质 MD 水平（P=0.033）。肿瘤长径大于等于 2cm 的宫颈癌患者癌间 质 MD 水平显著高于肿瘤长径小于 2cm 者（P=0.006）。TAMs 数量与病例年龄、 FIGO 分期、侵犯深度、组织分化、或组织学类型间无明显相关性（P0.05）。 结论 宫颈癌间质中的 TAMs 明显增加，且与淋巴管密度和淋巴转移相关。 关键词 肿瘤相关巨噬细胞；宫颈癌；淋巴转移 第二部分 宫颈癌微环境中巨噬细胞的来源 目的 探讨宫颈癌肿瘤间质中增加的 TAMs 的来源。 方法 1. 用 transwell 小室实验观察宫颈癌细胞 Hela、Siha 和 C33A 对经佛波酯诱 导 THP-1 单核细胞转