艾迪注射液新组方对肝癌荷瘤小鼠扶正作用及其机制初探.docVIP

艾迪注射液新组方对肝癌荷瘤小鼠扶正作用及其机制初探 　　【摘 要】目的：考察艾迪注射液新组方对肝癌H22荷瘤小鼠的扶正作用，并初步探讨其作用机制。方法：将肝癌H22荷瘤小鼠随机分为模型组、阳性对照组（5-Fu）和艾迪注射液新组方高中低剂量组（每组10只），腹腔注射生理盐水、5-Fu和三个不同剂量的艾迪注射液新组方，每天注射一次，连续7天。通过耐疲劳和耐缺氧实验，与正常组比较，考察艾迪注射液新组方对正常小鼠和肝癌H22荷瘤小鼠的扶正作用。通过测定免疫脏器系数，初步探讨扶正作用的机制。结果：艾迪注射液新组方能显著延长荷瘤小鼠耐疲劳和耐缺氧时间，高剂量可明显增加肝癌H22荷瘤小鼠脾脏系数，并无降低胸腺系数的不良反应。结论：艾迪注射液新组方对正常小鼠和荷肝癌小鼠均具有扶正作用，其机制可能与增强免疫功能作用有关。 　　【关键词】艾迪新组方；肝癌；扶正作用 　　艾迪注射液是由人参、黄芪、刺五加、斑螯等组成的中药复方抗肿瘤针剂，临床上主要用于原发性肝癌、肺癌、肠癌、鼻咽癌、泌尿系统肿瘤、恶性淋巴瘤和妇科恶性肿瘤的辅助治疗以及肿瘤术后的巩固治疗[1-2]。通过前期有效成分的药效学筛选，我们呢保留了艾迪注射液中的人参皂苷、刺五加皂苷、黄芪皂苷和斑蝥素等成分，并通过正交试验进行了成分间配比的优化，得到了艾迪注射液新组方。 　　本文通过比较正常小鼠和荷瘤小鼠的耐疲劳和耐缺氧实验，以及荷瘤小鼠免疫器官指数的测定，探讨了艾迪新组方对荷瘤小鼠的扶正作用及其机制。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验动物与细胞株 　　ICR小鼠（SPF）260只，体重23±2g，雄性，购自苏州大学实验动物中心；小鼠肝癌H22细胞购自中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所。 　　1.2 试剂 　　人参皂苷，黄芪皂苷，刺五加皂苷，（纯度均80%，苏州大学天然药物教研室自制，批号；斑蝥素（纯度90%，南京泽郎医药科技有限公司，批号：Z；5-氟尿嘧啶（购自上海旭东海普药业有限公司，批号：。 　　1.3 实验方法 　　1.3.1 实体瘤模型的建立 选取健康雄性ICR小鼠50只，体重23±2g，无菌抽取接种6d生长良好的肝癌H22小鼠腹水，稀释至细胞密度为1×107/mL，以每只0.2 mL无菌接种于小鼠右侧腋窝皮下制造实体瘤模型。 　　1.3.2 正常与荷肝癌小鼠耐疲劳实验 将接种肝癌H22细胞后的小鼠随机分为5组，每组10只。同时另外选取50只健康雄性ICR小鼠，也随机均分为相对应的5组。（1）模型对照组：生理盐水10 mL?kg-1?d-1；（2）艾迪新组方低剂量组：艾迪新组方5.5 mg?kg-1?d-1；（3）艾迪新组方中剂量组：艾迪新组方11 mg?kg-1?d-1；（4）艾迪新组方高剂量组：艾迪新组方22 mg?kg-1?d-1；（5）阳性对照组：5-氟尿嘧啶15mg?kg-1?d-1。肿瘤接种后次日开始腹腔注射给药，给药容积均为0.1mL?10g-1，连续7d。末次给药30min后将各组小鼠尾部负重（2g），放入水深20cm，水温（20±0.5）℃的玻璃缸内游泳。记录小鼠从入水到沉入水底不能再游出水面的时间。 　　1.3.3 正常与荷肝癌小鼠耐缺氧实验 末次给药30min后将各组小鼠放入容积为150mL的广口瓶中，加入20g变色硅胶，塞紧瓶盖，用凡士林封口后，立即计时，以呼吸停止为指标，观察小鼠存活时间。 　　1.3.4 艾迪新组方对免疫器官重量的影响 设艾迪新组方低、中、高三个剂量组，并设立正常对照组、模型对照组和阳性对照组。末次给药24h后（禁食10h）：称小鼠体重，处死动物，测量和计算脏器系数。胸腺系数（%）=（胸腺重量g/小鼠体重g）×100%；脾脏系数（%）=（脾脏重量g/小鼠体重g）×100%。 　　1.4 统计分析 　　数据用SPSS 13.0统计软件分析，计量资料均以x±SEM表示，组间比较采用单因素方差分析和t检验。 　　2 结果 　　2.1 艾迪新组方对正常小鼠和肝癌H22荷瘤小鼠耐疲劳的影响 　　随着艾迪新组方给药剂量的增加，正常小鼠和肝癌荷瘤小鼠的耐疲劳时间均有所延长，其中高剂量组与模型对照组相比具有显著差异。而5-FU组虽可通过对肿瘤的抑制作用，提高肝癌荷瘤小鼠的耐疲劳时间，但却明显缩短了正常小鼠耐疲劳时间（见表1）。 　　2.2 艾迪新组方对正常小鼠和肝癌H22荷瘤小鼠耐缺氧实验结果 　　艾迪新组方各给药组正常小鼠和肝癌荷瘤小鼠的耐缺氧时间均有所延长，且呈明显的剂量依赖性，特别是提高肝癌荷瘤小鼠的耐缺氧能力，其与模型对照组比较均显著提高。高剂量也可显著延长正常小鼠的耐缺氧时间。而5-FU却缩短了正常小鼠的耐缺氧时间（见表2）。 　　2