新型纤维素邻乙酰水杨酸酯类手性固定相合成及评价.docVIP

新型纤维素邻乙酰水杨酸酯类手性固定相合成及评价 　　摘 要 以纤维素和邻乙酰水杨酰氯为原料， 合成了纤维素邻乙酰水杨酸酯类手性固定相， 考察了其手性拆分能力， 与Chiralcel OJ手性色谱柱进行了比较， 并研究了流动相的组成以及衍生物中双酯羰基的结构对其拆分效果的影响。以红外光谱技术、热重分析等检测手段对获得的纤维素衍生物进行结构表征和分析。在对4种流动相： 正己烷异丙醇、正己烷乙醇、正己烷甲醇异丙醇、正己烷甲醇1，2二氯乙烷进行比较筛选后， 以正己烷异丙醇（90∶10～80∶20， V/V， 0.1% DEA或TFA）体系作流动相， 在正相色谱模式下， 对儿茶酚胺类及酰胺类手性药物进行了手性拆分， 结果表明， 三氟乙酸和二乙胺的最佳使用量均为0.1%， 双酯羰基结构的氢键、偶极作用和苯环的ππ作用相互协同确实有助于该类固定相手性拆分作用的形成。 　　关键词 ；邻乙酰水杨酸酯； 纤维素； 手性固定相 　　1 引 言 　　手性制药一直是医药研究的前沿领域[1]， 这是因为消旋体作为药物使用具有一定的风险， 两个对映体通常表现出不同的药效活性， 甚至其中之一还有毒性[2]。因此， 发展高效、快捷的手性药物拆分测定方法对用药安全具有重要的意义[3，4]。 　　据统计， 有近90%的手性样品可以在纤维素衍生物作为手性固定相上获得拆分[5～7]。Okamoto研究小组[8，9]曾证明纤维素三苯酯中苯基上取代基的类型和位置对纤维素衍生物的光学拆分能力有显著的影响――纤维素衍生物苯环上的取代基通过吸电子或斥电子作用减少或增加苯环和羰基氧上的电子云密度， 进而影响手性识别能力。 目前， 此类苯环取代基大都是简单的烃基或卤原子， 选择范围较窄， 而纤维素作为多羟基化合物， 凡是具有能与羟基键合的官能团的化合物均能对其修饰。受此启发并根据手性拆分的机理， 本研究组认为乙酰水杨酰氯是一种很有潜力的手性拆分用纤维素衍生化试剂， 其邻位的酯基既能提供一个羰基， 又对苯环起到活化并给电子的作用， 如与纤维素成酯， 将同时出现两个活泼酯羰基， 这对于手性拆分是十分有利的。而且目前该类纤维素衍生物无论在纤维素研究中， 还是手性拆分领域均未有见报道。本实验合成了邻乙酰水杨酸酯类手性固定相（Acelylsalicylte chiral stationary phase， ACSP）， 针对常用的氯苯那敏、儿茶酚胺类及酰胺类药物进行手性拆分， 根据拆分结果探讨其规律与特点， 并与商品柱进行比较， 研究其优势或不足， 为纤维素类手性固定相的种类扩展提供新的思路。 　　2 实验部分 　　2.1 仪器与试剂 　　Nicolet370FTIR红外光谱仪（美国Thermo公司）； TGA热重分析仪（Q500系统， 美国Waters公司）； LC30A高效液相色谱工作站（日本岛津公司）， 配置SPDM20A二极管阵列检测器； 商品柱Chiralcel OJ（由河南省食品药品检验所提供）。 　　微晶纤维素（聚合度DP≈100， Merck公司）； 邻乙酰水杨酰氯、γ氨丙基三乙氧基硅烷（KH550， 上海阿拉丁试剂公司）； 硅胶（粒径为5 μm， 孔径为120 ， 日本Daiso公司）； 无水N，N二甲基乙酰胺（DMAc）、氯化锂、无水吡啶（分析纯， 天津市科密欧化学试剂有限公司）； 甲醇、乙醇、1，2二氯乙烷、异丙醇和正己烷 　　2.2 酯化衍生纤维素的合成 　　将在80℃真空干燥6 h的纤维素1 g加入70 mL无水DMAc中， 130℃搅拌回流5 h； 冷至室温， 加入3 g 无水LiCl； 搅拌至纤维素完全溶解后[10]， 重新升温至100℃， 加入无水吡啶15 mL、7.4 g 邻乙酰水杨酰氯， 反应24 h后， 用大量甲醇沉淀、洗涤、过滤， 40℃真空干燥过夜后， 得纤维素衍生物5.6 g（见图2）。 　　2.3 氨丙基硅胶的制备 　　将3 g硅胶与160 mL无水甲苯加入烧瓶中， 氮气保护下加热回流， 除去吸附水。缓缓加入5 mL KH550与1 mL吡啶， 并加热至105℃， 回流。反应完后抽滤， 洗涤， 减压干燥后得氨丙基硅胶[11]。经热重分析， 键合量为7.7%（w/w）。 　　2.4 HPLC手性固定相的制备 　　称取1 g纤维素衍生物，溶于40 mL四氢呋喃中， 分次涂敷在3 g氨丙基硅胶表面，并旋转蒸发除去四氢呋喃[12]， 如此反复多次后即得ACSP。经热重分析， 涂敷量约为25.1%（w/w）。 　　2.5 色谱条件 　　色谱柱（15 cm×0.46 cm i.d.）。以正己烷异丙醇（80∶20， V/V）为匀浆液及填充液， 采用匀浆法装柱。检测条件： 柱温30℃； 检测波长段： 190～400 nm（附图