食品中动物用药残留量检验方法-四环霉素类抗生素之检验.pdfVIP

食品中動物用藥殘留量檢驗方法－四環黴素類抗生素之檢驗 Method of Test for Veterinary Drug Residues in Foods – Test of Tetracyclines 1. 適用範圍：本檢驗方法適用於畜禽水產等食品中殘留四環黴素類抗生素，包 括四環黴素(tetracycline, TC) 、羥四環黴素(oxytetracycline, OTC) 、 氯四環黴素 (chlortetracycline, CTC) 及 脫氧羥四環黴素 (Doxycycline)之檢驗。 2. 檢驗方法：高效液相層析法(high performance liquid chromatography, HPLC) 。 2.1 裝置： .2.1.1 高效液相層析儀： 2.1.1.1 檢出器 ：具有激發波長 380 nm ，發射波長 520 nm 之 (Fluorescencedetector)螢光檢出器。 2.1.1.2 層析管：Luna C18 (2) ，5 µm ，內徑4.6 mm × 25 cm 或同級品。 .2.1.2 均質機(Homogenizer) 。 .2.1.3 旋渦混合器(Vortex mixer) 。 .2.1.4 減壓濃縮裝置(Rotary evaporator) 。 2.1.5 離心機(Centrifuge) 。 . 2.2 試藥： 甲醇採用液相層析級，磷酸氫二鈉、醋酸、檸檬酸、咪唑(imidazole) 、 醋酸鎂、Na -EDTA (disodium ethylenediaminetetraacetate) 、正己烷、氯 2 仿、鹽酸及氫氧化鈉均採試藥特級；鹽酸四環黴素、鹽酸氯四環黴素、 鹽酸羥四環黴素及鹽酸脫氧羥四環黴素對照標準品。 2.3 器具及材料： 2.3.1 抽氣瓶：1000 mL 。 2.3.2 . C18 固相萃取匣： 500 mg ，Oasis HLB 或同級品。. 2.3.3 濃縮瓶：100 mL 。 2.3.4 濾膜：孔徑0.22 µm 、0.45 µm ，polyvinylidene difluoride 材質。 2.3.5 容量瓶：100 mL 。 2.3.6 分子量分割過濾裝置(Molecular weight cutoff filter) ：Centricon YM-30 或同級品。 2.4 試劑之調製： 2.4.1 0.1 M 檸檬酸溶液： 稱取檸檬酸 1.9 g ，以水溶解後使成100 mL 。 2.4.2 0.2 M 磷酸氫二鈉溶液： 稱取磷酸氫二鈉 2.84 g ，以水溶解後使成100 mL 。 2.4.3 pH 4.0 MacIlvaine 緩衝溶液： 量取0.1 M 檸檬酸溶液615 mL 和0.2 M 磷酸氫二鈉溶液385 mL 混 合後，必要時調整pH 值。 2.4.4 含0.01 M Na -EDTA 之pH 4.0 MacIlvaine 緩衝溶液： 2 1 稱取Na -EDTA 3.36 g ，以pH 4.0 MacIlvaine 緩衝溶液 1,000 mL 溶 2 解。 2.4.5 pH 7.2 咪唑緩衝溶液： 稱取咪唑 68.08 g ，醋酸鎂 10.72 g 及Na -EDTA 0.37 g ，以去離子水 2 800 mL 溶解，用醋酸調pH 值至7.2 後以去離子水定容至