水中壬基酚残留检测方法研究及其应用.docVIP

水中壬基酚残留检测方法研究及其应用 　　摘要：建立了固相萃取-高效液相色谱和浊点萃取-高效液相色谱2种方法检测水溶液中壬基酚，分析了2?N方法对水溶液中壬基酚回收率的影响。固相萃取以C18小柱作为固相萃取小柱，5 mL甲醇作为洗脱液进行固相萃取，后经HPLC检测，回收率可以达到80.28%～82.38%，相对标准偏差为0.40%～4.57%，检出限为0.9 μg/L。浊点萃取以非离子表面活性剂聚乙二醇-6000（PEG-6000）作为萃取剂，在33 g/L的PEG-6000，溶液pH值为2.0，160 g/L Na2SO4，45 ℃水浴15 min条件下进行浊点萃取，用HPLC检测。壬基酚的质量浓度在0.02～2.0 mg/L时，其质量浓度与HPLC检测峰面积呈现良好的线性关系，相关系数为0.999 4，检出限为0.4 μg/L；壬基酚的萃取率为84.97%～101.64%，相对标准偏差为0.03%～4.40%，符合有机污染物检出方法要求。通过斑马鱼急性毒性试验，检测水中壬基酚含量，证明浊点萃取-高效液相色谱法用于检测水中壬基酚残留的方法可行。对比固相萃取，浊点萃取更具发展前景。 　　关键词：壬基酚；浊点萃取；固相萃取；高效液相色谱法；水 　　中图分类号： S481+.8；TQ450.2+64文献标志码： A 　　文章编号：1002-1302（2017）09-0147-04 　　壬基酚（nonylphenol，简称NP）是一种用于合成非离子表面活性剂-壬基酚聚氧乙烯醚（NPEOs）的主要原料，也是其降解产物，广泛存在于环境介质（水体、土壤、沉积物及大气）中[1-2]；NPEOs作为一种农药助剂，还广泛应用于各种农药制剂中。2001年联合国环境规划署已经将NP确定为27种优先控制的持久性有毒污染物之一，欧盟于2013年7月通过了《关于统一各成员国有关限制销售和使用某些危害物质及制品的法律法规和管理条例》（2003/53/EC），该法规禁止在欧洲地区销售和使用含量超过0.1%的NPEOs或者NP的产品及其配方产品[3]。我国也在初步探讨禁止在农药制剂中添加或少添加NPEOs[4]。与NPEOs相比，壬基酚较难继续降解，毒性、亲脂性强，易富集，且有促癌作用和内分泌干扰效应[5-8]。壬基酚在水中的溶解度较低，在分析检测时往往需要进行前处理将其富集。主要的前处理技术有液-液萃取、固相萃取、微波溶出、加速溶剂萃取及超临界流体萃取等方法[9]，检测方法主要为液相色谱、气相色谱或者气-质联用。 　　固相萃取（solid phase extraction，SPE）是指使用固体吸附剂将待测组分选择性吸附或选择性洗脱达到富集、分离、净化的一种前处理技术。吸附剂种类、用量、保留体积、流速、洗脱溶剂均是影响固相萃取效率的主要因素。除了传统的固相萃取技术以外还出现了全自动固相萃取、固相微萃取、磁力搅拌棒吸附萃取、基质分散固相萃取和分子印迹固相萃取等固相萃取技术[10]。固相萃取技术在环境样品分析检测中应用广泛，特别是针对水样的预处理。固相萃取技术与色谱和质谱等检测手段的联用是有机污染物残留检测分析的一种重要手段。 　　浊点萃取法（cloud point extraction，CPE）是一种环境友好型液-液萃取技术，利用表面活性剂作为萃取剂，避免使用挥发性有机溶剂，成本较低且对环境几乎无危害，可以达到令人满意的回收提取率和富集效率[11-13]。表面活性剂的分子由非极性基团――疏水基和极性基团或离子基团――亲水基组成。水溶液中表面活性剂质量浓度的增加使得疏水基聚集成核，亲水基向外张开，从而形成胶束[14]。表面活性剂的溶解度随着溶液温度的升高逐渐降低，升至一定温度后，整个溶液变浑浊，此时的温度被称为表面活性剂的浊点（cloud point，CP）。表面活性剂的水溶液在静置或离心后可以得到2个分离的透明液相：表面活性剂相（或束胶相）和水相。表面活性剂溶液分层时，疏水性物质随着疏水基进入表面活性剂相，而亲水性物质留在水相中，这种通过提升温度使溶液产生浊点现象，并将样品中对水具有不同亲合性的物质进行分离的方法被称为浊点萃取法[14]。浊点萃取技术最早应用于金属离子的检测[15]，近年来浊点萃取技术作为一种前处理技术在有机污染物残留检测分析中应用也十分广泛[16]。 　　本研究通过建立固相萃取和浊点萃取2种萃取方法回收水中壬基酚，利用高效液相色谱进行检测，分析2种萃取方法对水中壬基酚回收率的影响，并通过斑马鱼急性毒性试验验证浊点萃取-高效液相色谱法的可行性。 　　1材料与方法 　　1.1试剂与仪器 　　壬基酚（异构体混合物）（上海子起生物科技有限公司）；甲醇（色谱纯）、丙酮（分析纯）、乙腈（色谱纯）、超纯水（18.2 MΩ/cm）；曲拉通