食品中沙门氏菌属检验方法—垂直膜过滤法（征求意见稿）.docVIP

××/T ××××—×××× PAGE II PAGE 1 发布中 华 人 民 共 和 国国家质量监督检验检疫总局 200×-××-××实施200 发布 中 华 人 民 共 和 国 国家质量监督检验检疫总局 200×-××-××实施 200×-××-××发布 食品中沙门氏菌属检验方法 — 垂直膜过滤法 Inspection of Salmonellae in food Vertical membrane filting method （征求意见稿） SN/T ××××—×××× 代替SN/T 1059.6—2008 SN/T 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 ICS 备案号： SN/T ××××—×××× PAGE 6 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准代替SN/T 1059.6-2008《进出口食品中沙门氏菌属检验方法— 垂直膜过滤法》。 本标准与SN/T 1059.6-2008 相比，主要变化如下： ——修改了标准的中英文名称； ——修改了标准的范围； ——修改了规范性引用文件； ——修改了培养基； ——修改了附录A、附录B。 本标准的附录A、附录B 为规范性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：吴斌、孙杰、蔡晓萍、刘钊、胡传伟、贾贇。 本标准所代替的历次版本发布情况为： SN/T 1059.6-2008 食品中沙门氏菌属检验方法—垂直膜过滤法 1　范围? 本标准规定了食品中沙门氏菌属-垂直膜过滤检验方法。 本标准适合于所有食品中沙门氏菌属的检验。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 4789.4 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验 GB 19489 实验室 生物安全通用要求 3 方法原理 本方法是基于垂直过滤的方式使测试样品通过包被有特别沙门氏菌抗体的膜，样品中的沙门氏菌抗原与膜上抗体结合，通过酶偶合物将抗原抗体结合物显色。若是阳性样品，试剂中央就会出现蓝色的圆点，反之为无色或淡蓝色的圆点。 4 设备和材料 4.1 滤器：一套,备有预滤器。 4.2 真空泵。 4.3 滤膜：有机相或水相,孔径0.45μm。 4.4 培养箱：36℃±1℃，42℃±1℃。 4.5 水浴箱：45℃±1℃，36℃±1℃。 4.6 吸管：1mL、10mL,具刻度。 4.7 玻璃三角瓶和广口瓶：250mL、500mL。 4.8 玻璃试管：17mm ×l70mm。 4.9 玻璃珠：5mm。 4.10 平皿：直径90mm。 4.11 天平：感量0.1g。 4.12 均质器。 5 培养基和试剂 5.1 缓冲蛋白胨增菌液：见附录A.1 5.2 RVS肉汤：见附录A.2 5.3 MKTTn肉汤：见附录A.3 5.4 XLD.琼脂平板：见附录A.4 5.5 BS.琼脂平板：见附录A.5 5.5 HE琼脂平板：见附录A.6 5.6 沙门氏菌检测膜。 6 样品制备和增菌培养 6.1 肉制品样品制作和增菌培养 6.1.1 如为冷冻肉制品，应在45 ℃以下不超过15min，或在2℃～5℃不超过18h解冻。若不能及时检验,应置于-15℃左右保存。非冷冻而易腐的食品， 6.1.2 无菌操作，称取剪碎后的瘦肉样品25g，置于灭菌均质杯内,加入225 mL灭菌缓冲蛋白胨水增菌液，以8000～10000 rpm均质1min，于37℃水浴培养18h±2h，进行前增菌；其后，移取0.1mL的前增菌液转种于盛有10mL RVS肉汤的玻璃试管