水产品中氯霉素残留检测方法 放射受体分析法（征求意见稿）.docVIP

SN/T ××××—200× PAGE II PAGE 1 中华人民共和国质量监督检验检疫总局发布20××-××-××实施20×× 中华人民共和国质量监督检验检疫总局发布 20××-××-××实施 20××-××-××发布 水产品中氯霉素残留检测方法 放射受体分析法 Determination of chloramphenicol residues in aquatic product—Radio-receptor assay method （征求意见稿） SN/T 1966—XXXX SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T ××××—20×× PAGE I 前 言 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：相大鹏、翁文川、林峰、谢敏玲 本标准代替SN/T 1966-2007《水产品中氯霉素残留检测方法 放射受体分析法》。 本标准与SN/T 1966-2007相比，主要修改如下： ——增加了试剂与材料； ——修改了试剂盒性能监测； 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： ——SN/T1966-2007。 PAGE 3 水产品中氯霉素残留检测方法 放射受体分析法 范围 本标准规定了水产品中氯霉素残留量测定的制样和放射受体分析（CharmⅡ）方法。 本标准适用于水产品中氯霉素残留量的筛选测定。 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682 《分析实验室用水规格和试验方法》 试样制备和保存 试样的制备 从全部样品中取出不少于500 g有代表性试样，用高速组织捣碎机均质，将捣碎的样品充分混匀。装入清洁的容器内，加封并做标识。 在制样的过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。用于测定的样品细菌数不能超过106 /g。 试样保存 将试样于-18℃以下冷冻保存。 测定方法 原理 测定的基础是竞争性受体免疫反应。样品中的氯霉素残留经提取后，与[3H]标记的氯霉素竞争细菌细胞中的氯霉素特异性受体，样品中的氯霉素药物含量越高，竞争结合的位点越多，[3H]标记的氯霉素结合的位点则越少。在一定温度反应后，离心分离，清除未结合的[3H]标记的氯霉素，加闪烁液后用液体闪烁计数仪测定样品中的[3H]含量cpm值(count per minute，即每分钟脉冲数)。cpm值越低，则样品中的氯霉素残留越高。 试剂和材料 水 GB/T 6682规定的一级水。 组织中氯霉素检测CharmⅡ试剂盒）Charm ）CharmⅡ竞争性受体结合组织氯霉素测试试剂盒是由Charm公司提供的产品的商品名称。给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 每批新试剂盒使用前须进行性能监测。 竞争性结合试剂：应贮存在-15℃或以下，在室温（15℃～25℃）下最多放置6 h。 [3H]标记的氯霉素：应贮存在-15℃或以下，在室温（15℃～25℃）下最多放置6 h。 阴性对照浓缩溶液：干粉贮存于2℃~6℃，使用时取浓缩干粉按标签上标记配制成阴性对照浓缩溶液，配制好的溶液可在2℃~6℃冰箱或冰浴中保存48 h；于?15℃以下的冰箱中，则可保存2个月，使用时将其解冻，解冻后的溶液在2℃~6℃冰箱或冰浴中保存24 h。 10μg/L氯霉素标准溶液：干粉贮存于2℃~6℃，使用时按照标签溶解，氯霉素的浓度为10μg/L。溶液的保存方法同上。4.2.2.2所述。 萃取缓冲溶液：干粉贮存于2℃~6℃，使用时按照标签溶解，该缓冲溶液可在2℃~6℃下保存2个月。 M2缓冲液：干粉贮存于2℃~6℃，使用时按照标签溶解，该缓冲溶液可在2℃~6℃下保存2个月。 闪烁液。 盐酸，分析纯。 1 mol/L盐酸：吸取8.32mL盐酸（4.2.2.8）加水定容至100mL。 pH试纸：pH范围5.0~10.0。 仪器和设备 液体闪烁计数仪(LSC) 旋涡振荡器 恒温孵育器 离心机，最大转速为4 000 r/min 高速组织捣碎机 硅硼酸盐玻璃试管及试管塞 移液器1mL~5mL，100μL~1000μL。 分析步骤 阴性和阳性对照液的配制 阴性对照液的配制 取2 mL阴性对照浓缩溶液(4.2.2.3)，加至6 mL萃取缓冲溶液(4.2.2.5)中，在室温下混合均匀，制成阴性对照液，该对照液可在室温（15℃～25℃）下保存6 h以上。用于分析仪器性能监测和测定控制点。 阳