云南省食品安全地方标准《食品中展青霉素的测定-液相色谱串联质谱法》编制说明.docVIP

— PAGE 6 — — PAGE 1 — 《食品中展青霉素的测定 液相色谱-串联质谱法》编制说明 一、制定的必要性和重要性 展青霉素（Patulin，CAS:149-29-1）又叫棒曲霉素，是由青霉属菌曲霉属菌和根霉属菌等几种菌的代谢产物合成的真菌毒素，该物质具有神经毒性、遗传毒性、致畸和潜在的免疫毒性，可引起恶心、呕吐、便厥和昏迷等症状及体征。在自然界分布广泛，主要污染水果及其制品，对人体危害极大。展青霉素的限量标准在大多数欧美国家为0-50μg/kg；WHO推荐展青霉素在苹果汁中的最高限量标准为50μg/kg；我国相应的标准规定苹果、山楂半成品限量标准为100μg/kg，果汁、果酱、果酒、罐头和果脯的限量标准为50μg/kg。 目前，展青霉素的分析方法主要有薄层色谱法、免疫化学法、毛细管微乳液电动色谱法、气相色谱法、液相色谱法、气相色谱-质谱法以及液相色谱-质谱法等。实际应用中以液相色谱法居多，但液相色谱法存在灵敏度不高，且溶液出现假阳性结果的弊端。因此，液相色谱-质谱法越来越受到人们的重视。 现有国家标准中关于检测检测食品中展青霉素标准方法只有三个：SN/T 1859-2007《饮料中棒曲霉素和5-羟甲基糠醛的测定方法 液相色谱-质谱法和气相色谱-质谱法》、GB/T 5009.185-2003《苹果和山楂制品中展青霉素的测定》和SN/T 2534-2010《进出口水果和蔬菜制品中展青霉素含量检测方法 液相色谱-质谱/质谱法与高效液相色谱法》。以上三种方法对检验产品的覆盖面很小，目前可能受到展青霉素和污染的食品种类很多，但国内外还没有可以大范围应用的标准，鉴于展青霉素污染带来的巨大危害性，急需找到一种科学、操作简单、易于推广的检测方法。 本标准的制定将为我省甚至国内使用液相色谱-质谱、质谱法进行食品中展青霉素污染物测定的开展和实施提供一个规范性依据，同时也将是对我省检测技术和能力的一个重大提升。 二、项目来源和主要工作过程 本标准由云南省产品质量监督检验研究院提出并起草，主要起草人为：冯雷、牛华、祝红昆、牛之瑞、珠娜、李波、王亚琴、张晓红。主要工作过程大体分为两个阶段：一是标准方法的建立；二是标准方法的验证和标准的起草。具体经过了如下过程： （一）探索性试验及方法的初步设计； （二）对试样前处理方法的摸索和改进； （三）进行条件试验，回收率试验等； （四）进行大量样品测定及方法验证； （五）标准的起草。 三、编制的原则和主要依据及与现行法律、法规、标准的关系 本标准制定遵循的基本原则和主要依据如下： （一）规范性 本标准的编制严格按照GB/T1.1—2000和GB/T1.2—2002“标准化工作导则” 第一单元“标准的起草与表述规则” 的相关规定进行； （二）科学性 本标准的编制查阅了大量国内、国外相关科学文献资料及进行了大量实验验证，并对其中每一个环节的合理性和严谨性及文字表述方面均进行了反复的探讨和确证； （三）可操作性 本标准的可操作性强。首先，标准文字表述简明、直白，易于理解；其次，标准对所需试剂、设备等均无特殊性和专有性要求。 （四）易推广性 本标准针对样品前处理这一对检测结果影响甚大的关键环节进行了重点研究，最终确立的前处理操作方便、简单、安全；省内主要检测机构都已经配备液相色谱－质谱／质谱仪，一般的检验机构都可较容易的的掌握此检测方法，易于在全省范围内推广。 本标准符合相关法律、法规，与相关国家、行业标准相协调。 四、主要内容、适用范围及主要条款说明 本标准包含方法的原理、试剂、仪器、分析步骤、结果表述等主要技术内容。适用于食品（果汁饮料、果酒、果酱、果干及薯类制品等）中展青霉素的测定和确证。 （一）原理 澄清液体样品（果酒样品需出去乙醇）直接固相萃取净化；混浊液体样品和固体样品先用果胶酶水解，再以乙酸乙酯提取，吹干浓缩后固相萃取净化，液相色谱-质谱/质谱法测定，外标法定量。 （二）试剂及仪器 根据实际使用列出，标准中“4.1～4.14”所列试剂均为通常常规试剂，试剂级别为标准起草实验实际使用，亦为推荐性要求；仪器均无特殊要求。需要说明的是，本标准起草实验所用的液相色谱仪为美国WATERS公司生产，型号为：ACQUITY超高效液相色谱；所用三重四级杆串联质谱联用仪为美国AB公司，型号为：API3200，该标准方法中所有实验数据均是通过该仪器得出，不同仪器可能会存在一点偏差，但不会影响该标准 （三）分析步骤及结果表述 1、在“试样处理”部分花了大量功夫、作了大量研究，尤其是在对饮料混汁、果酱和果干试样的前处理上。 对饮料清汁样品的前处理这一环节，直接固相萃取净化法，方法简单、安全、可操作性强、结果可靠。 饮料混汁和果酱这样的试样，需要先将样品中的果胶累物质以果胶酶水解，以便于展青霉素能充