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生醋莪术对大鼠免疫性肝纤维化及HSC―T6增殖和α―SMA,ProcollagenⅠ表达影响
生醋莪术对大鼠免疫性肝纤维化及HSC―T6增殖和α―SMA,ProcollagenⅠ表达影响
[摘要] 比?^生、醋莪术对猪血清所致大鼠免疫性肝纤维化及对活化的肝星状细胞(HSC-T6)增殖和α-SMA,ProcollagenⅠ表达的影响。采用腹腔注射猪血清0.5 mL/只,每周2次,共14周制备大鼠免疫性肝纤维化模型。观察生、醋莪术(0.95,1.90 g?kg-1)对大鼠血清ALT,AST,PC-Ⅲ,IV-C,LN,HA和肝组织HYP,MDA的表达水平;采用HE染色观察大鼠肝组织病理改变情况,Masson染色和天狼猩红染色观察大鼠肝组织中胶原表达情况;体外培养HSC-T6细胞,MTT法测定不同浓度生、醋莪术含药血清作用12,24,36,48 h对HSC-T6增殖的影响;采用Real-time PCR法检测各组α-SMA和ProcollagenⅠ表达情况。结果显示,给药生、醋莪术后,大鼠血清ALT,AST,PC-Ⅲ,IV-C,LN,HA表达水平均下降,与生莪术组相比,醋莪术组作用效果优于生莪术组;生、醋莪术含药血清各剂量组均能抑制HSC-T6的增殖,呈现一定的量效和时效关系;各给药组作用24 h后,HSC-T6中α-SMA和Procollagen Ⅰ表达水平降低,且醋莪术组降低更显著。生、醋莪术均能不同程度减轻肝纤维化,其抗肝纤维化机制可能与抑制HSC-T6增殖,减少细胞外基质的生成并促进其降解有关。
[关键词] 莪术;醋莪术;肝纤维化;肝星状细胞;Real-time PCR;α-平滑肌肌动蛋白;Procollagen Ⅰ
[Abstract] To compare the effects of Curcumae Rhizoma/vinegar-processed Curcumae Rhizomaon immune hepatic fibrosis, proliferation of HSC-T6, and expressions of α-SMA and Procollagen I. The immunological liver fibrosis model was prepared through intraperitoneal injection with porcine serum 0.5 mL in each rat, twice a week, for 14 weeks. Expressions of serum ALT, AST, PC-Ⅲ, IV-C, LN, HA and HYP, MDA in liver tissues were observed after administration of Curcumae Rhizoma/vinegar-processed Curcumae Rhizoma (0.95, 1.90 g ? kg-1). The pathological changes in liver tissues were observed by HE staining. Masson staining and Sirius red staining were used to observe the expression of collagen in rat liver. HSC-T6 was cultured, and the proliferation of HSC-T6 was determined by MTT assay at different concentrations in 12, 24, 36, 48 h. The expressions of α-SMA and Procollagen I were detected by Real-time PCR. The results showed that expressions of serum ALT, AST, PC-Ⅲ, IV-C, LN and HA in Curcumae Rhizoma/vinegar-processed Curcumae Rhizoma groups (0.95, 1.90 g?kg-1) were significantly lower than model group;in terms of effect, vinegar-processed Curcumae Rhizoma group was superior to Curcumae Rhizoma group. Curcumae Rhizoma/vinegar-processed Curcumae Rhizoma containing serum could inhibit the proliferation of
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