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溶痰液在抗酸杆菌检测中应用及其方法学评价
溶痰液在抗酸杆菌检测中应用及其方法学评价
[摘要] 目的 探究溶痰液涂片法在痰液的抗酸杆菌检测中的意义和价值。方法 收集2011年6月―2013年6月期间于该院检验科痰液检查者的痰标本共计1100份,将每一份样本同时进行直接涂片法和溶痰液涂片法来检测痰标本中的抗酸杆菌,检测两种方法对抗酸杆菌的阳性检测率。结果 溶痰液涂片法的阳性率为3.09%,直接涂片法阳性率为1.36%,前者明显高于后者,其差异具有统计学意义(P0.05)。并且各种痰液的检出率和阳性等级都高于直接涂片法。 结论 在结核病的抗酸杆菌的检测方法中,溶痰液涂片法阳性检测率明显优于直接涂片法,可以作为快速诊断结核病的方法和手段,值得在临床上推广应用。
[关键词] 直接涂片法;溶痰液涂片法;抗酸杆菌
[中图分类号] R [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742(2015)01(b)-0180-02
结核病是指由于结核杆菌引起的慢性感染性疾病,主要的传播途径是呼吸道、消化道、皮肤以及子宫,其中最主要是通过呼吸道,主要的临床表现是午后低热、乏力。现今结核病仍旧严重地危害着人类的健康[1]。当前对肺结核患者进行细菌学检查是发现和检测传染源最主要的途径,这也是肺结核患者在确定诊断和治疗方案的重要依据[2]。该研究通过回顾性分析2011年6月―2013年6月期间该院住院以及门诊肺结核患者痰液通过直接涂片法和溶痰液涂片法检测结果的差异,从而探究溶痰液在抗酸杆菌检测中的意义和价值,现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
来该院检查患者在不同时间段(晨痰、即时痰和夜间痰)以及不同性质(唾液痰、黏液痰、血痰和脓性痰)的痰标本共计1100份。
1.2 方法与仪器
直接涂片法:将合格的痰液标本3 mL左右置于标本盒或者广口容器内,将其中0.1 mL左右的脓样痰液、干酪样的痰液用竹签挑取,放置在一块干净的载玻片中央,均匀地涂抹为2×2.5 cm大小的卵圆形痰膜。痰液自然干燥、固定、染色以后进行镜检。
溶痰剂涂片法:将合格的痰液标本10 mL左右置于消毒后的广口容器内,加入5倍的无菌蒸馏水,121 MPa高压蒸汽灭菌20 min后,将痰检体和BASO溶痰剂以1:2或者1:3的比例混合均匀,静置10~20 min,待检体完全融化后,于10 000转/min下离心,除去上清液,取沉淀涂片染色后进行镜检。该研究所采用的染色方法为最常用的Ziehl-Neelsen抗酸染色法[3];经过染色以后抗酸杆菌为红色,其他细菌和背景则被染成了蓝色。
1.3 观察指标
根据《中国结核病防治规划实施工作指南》[4]中有关镜检和报告标准进行报告,具体如下:(1)镜下计数一百个视野,并且观察的时间不能低于4 min,没有发现抗酸杆菌,继续观察连续三百个视野,仍然没有发现有抗酸杆菌,则报告为抗酸杆菌阴性,用“-”来表示。(2)镜检100~300个视野,若发现有1~2条抗酸杆菌,则记录下所发现的抗酸杆菌的条数以及观察的的视野数,报告为抗酸杆菌可疑(±)。并且对标本进行复查,重新涂片。(3)镜检小于100个视野,发现有3~9条AFB,则记录下100个视野内抗酸杆菌的数目,报告为抗酸杆菌阳性(1+)。(4)镜检小于10个视野发现有1~9条抗酸杆菌则报告为抗酸杆菌阳性(2+)。(5)若镜检每个视野都发现有1~9条抗酸杆菌则报告为抗酸杆菌阳阳性(3+)。(6)若镜检每个视野发现的抗酸杆菌数量都大于9条,则报告为抗酸杆菌阳性(4+)[5]。
1.4 统计方法
该研究采用SPSS16.0统计学软件对所得的数据进行整理分析,计量资料均数±标准差(x±s)表示,采用t检验;计数资料采用χ2检验。检验标准α=0.05。
2 结果
2.1 痰标本检测结果
2011年6月―2013年6月期间来该院检查患者的痰标本共计1100份,不同的去痰时间段以及标本性质检测,见表1。
表1 1100份痰标本检测结果(份)
2.2 两种不同涂片方法对1100份痰液标镜检结果
直接涂片法对1100份痰液镜检阳性率为1.36%(15/1100),而溶痰液涂片法进行镜检阳性率为3.09%(35/1100),溶痰液涂片法的阳性率要明显高于直接涂片法,两种方法阳性检测率差异有统计学意义(χ2=16.432,P 0.05),见表2;即时痰、夜间痰、晨痰痰液标本利用直接涂片法其阳性检测率分别为0.75%、1.30%、2.69%,而利用溶痰剂涂片法其镜检阳性检测率分别为1.5%、2.60%、6.15%。溶痰液涂片法对不同性质的痰液标本镜检阳性率要明显高于直接涂片法,差异有统计学意义(χ2=16.432,P0.05),见表3。
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