玉米单倍体诱导系及其杂交种对不同类型F1诱导率评价与应用.docVIP

玉米单倍体诱导系及其杂交种对不同类型F1诱导率评价与应用 　　摘要：综合不同诱导系优良性状，组建了诱导系间杂交种，优化玉米（Zea mays）单倍体诱导技术，克服单倍体植株弱小、花粉量少、抗逆性差等缺点，研究了玉米单倍体诱导系及其杂交种对不同类型F1的诱导效果。结果表明，诱导率与母本基因型间差异达极显著水平，与父本间差异达显著水平。LA11的诱导率明显高于农大高诱1号，而两者的杂交种植株高大，雄花花粉量大，抗逆性强，综合性状明显优于两个诱导系，且诱导率接近较高的LA11，可以用于自然杂交诱导育种；自然加倍率与父本无关，与母本基因型关系密切。 　　关键词：玉米（Zea mays）；单倍体诱导系；诱导率；自然加倍率 　　中图分类号：S513 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2015）18-4398-03 　　DOI：10.14088/ki.issn0439-8114.2015.18.004 　　玉米单倍体诱导育种技术已成为国内外种业公司及科研院校主要的玉米选系技术，国际大型种业公司已经具有成熟的DH育种体系，实现了规模化和工厂化育种。自Coe[1]发现了诱导系“Stock6”以来，通过几十年的研究，以“Stock6”为基础诱导系的改良得到了突飞猛进地发展。Chang[2]将控制子粒糊粉层和胚芽色素形成的AcR-nj基因和控制不定根、叶鞘和茎秆色素形成的ABPI基因导入“Stock6”，使之成为具有子粒和植株显性双遗传标记的孤雌生殖诱导系，并在育种中得到了应用。在中国，刘志增等[3]用一个高油玉米改良群体“BHo”和“Stock6”杂交，经多代自交和测交选育出“农大高诱1号”单倍体诱导系，其诱导率可达5.8%，并广泛应用于国内各科研院校及企业中。 　　本试验以两个诱导系及其杂交种作父本，用3个不同类型的杂交种作母本进行杂交诱导，对不同诱导系及系间杂交种和不同类型母本的诱导率进行研究与评价，同时对不同诱导系及其杂交种诱导产生的单倍体自然加倍率进行研究与探讨。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　母本为同一类群组配的杂交种（F1），分别为L1：自育系N21×TD1（马齿型）；L2：Y8201×F19（中间型）；L3：18599×SW1（硬粒型）。父本为农大高诱1号、LA11及其杂交种农大高诱1号×LA11（表1）。 　　1.2 方法 　　1.2.1 组建母本和父本杂交种 2012年春季在湖北恩施天池山试验基地进行，分别组建杂交组合L1、L2和L3及农大高诱1号×LA11，冬季在海南陵水基地进行杂交诱导。 　　1.2.2 试验设计 选好隔离区，采用制种方式进行自然授粉杂交。试验采用双列杂交法，3个父本分别与3个母本杂交， 共9个处理，每个处理40行，其中母本30行，父本10行（父母本按1∶3间比排列），行长4 m，宽67 cm，株距33 cm，每行12株。当母本一叶一心期时播父本。在授粉期间，对母本严格去雄，并对每个小区进行隔离，防止外来花粉进入授粉。 　　1.2.3 单倍体鉴选 成熟收获后，根据子粒的R-nj标记挑选出拟单倍体种子，同时记下总粒数和拟单倍体数。 　　1.2.4 单倍体自然加倍 获得的准单倍体子粒于2013年春季在恩施天池山试验地种植。种植行长4 m，行距50 cm，株距20 cm。因单倍体发芽力和生活力非常弱，因此在播种期及苗期，田间管理应相当精细。上年深翻松土，越冬后田间加施有机肥，用耕整机平整田块，土壤条件适宜时起垄覆膜，保证土壤湿度和温度，打孔播种，单粒精播，用细湿土盖种，力保全苗。待5～8叶期，通过观察叶鞘颜色和植株生长势等判断，去除假单倍体植株，并第1次确定单倍体数量；在开花授粉期间，根据植株颜色及长势去除假单倍体植株，再次确定单倍体数量。 　　1.2.5 诱导率的统计与分析 诱导率=（真实单倍数/总粒数）×100%。 　　1.2.6 自然加倍率的统计与分析 主要针对恩施州农业科学院天池山基地海拔较高、温差较大等特异的气候、生态条件，对玉米单倍体进行自然加倍，分析探讨诸因素对玉米单倍体加倍效率的影响。 　　加倍率=（收获DH数/总株数）×100%。 　　以上数据均用Excel 2003软件进行分析。 　　2 结果与分析 　　2.1 不同诱导系及其杂交种对不同玉米群体诱导结实性分析 　　通过R-nj标记性状对单倍体子粒进行鉴选，对子粒总数进行统计，由表2和表3可知，两个诱导系诱导产生的总粒数和单倍体数在同一水平上，而用诱导系间杂交种农大高诱1号×LA11作父本诱导的母本总子粒数和单倍体数明显高于前两者。这可能是在自然杂交授粉过程中，由于两个诱导系生育期较短，田间长势弱，花粉量少，导致母本群体授粉结实性差；相反，杂交种长势旺，花粉量大，母本授粉结实性好