肠上皮细胞紧密连接研究进展.docVIP

肠上皮细胞紧密连接研究进展 　　[摘要] 肠上皮细胞紧密连接（TJ）在肠道黏膜屏障中起着重要作用，其受损会导致细胞间的通透性增加，细菌、内毒素和大分子物质通过细胞旁路途径进入其他组织、器官或体循环，从而引发疾病。本文从蛋白角度和信号通路角度介绍肠上皮细胞TJ的研究进展，并进一步指出肠黏膜受到刺激后分泌大量的Zonulin蛋白，其与Zonulin受体结合，传导信号，调控TJ上Claudin、Occludin、JAM、ZOs、Cingulin等多种蛋白的表达，从而开放TJ。肿瘤坏死因子-α通过激活核转录因子κB p65/p50异源二聚体与启动子下游κB结合区域结合激活肌球蛋白轻链激酶转录启动子是TJ信号通路中较为成熟的通路。 　　[关键词] 紧密连接；肠上皮细胞；信号通路 　　[中图分类号] R574.1 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2015）02（c）-0160-04 　　肠屏障是指肠道能够防止肠内有害物质穿过肠黏膜进入其他组织、器官和血液循环的结构和功能的总和。肠屏障由机械屏障、化学屏障、免疫屏障和生物屏障共同构成，其中机械屏障最为重要。机械屏障由肠上皮细胞及其连接构成，调控着水和溶质的跨上皮转运。肠上皮细胞间的连接包括紧密连接（tightjunction，TJ）、缝隙连接（gapjunction，GJ）、黏附连接（adhesion junction，AJ）及桥粒（desmosome）等，其中，TJ在肠屏障中发挥着重要作用。在透射电镜下观察，TJ位于上皮细胞顶端，呈箍状围绕在细胞的周围，线条清晰连续，边缘光滑流畅，可与下段复合连接勾勒出纤毛柱状上皮细胞的柱状形态。TJ由50多种蛋白组成，分为结构蛋白和功能蛋白。结构蛋白构成TJ的结构骨架；功能蛋白连接细胞骨架及膜蛋白，并传递信号[1]。TJ一方面调控着细胞的通透性，另一方面作为信号中心在细胞外环境和细胞内之间进行着双向信息传递，调节着细胞的生长以及细胞的极性、表型和信号转导等[2]。在生理情况下，离子及小分子物质能够通过TJ，毒性大分子和微生物则不能通过。如果TJ受损，会导致细胞通透性增加，细菌、内毒素和大分子物质通过旁路途径进入其他组织、器官或体循环，从而引发多种疾病，例如炎症性肠病、腹泻、乳糜泻、食物过敏等。当前国内外主要从蛋白角度和信息通路角度研究肠上皮细胞TJ，本文主从这两个角度介绍其研究进展。 　　1 从蛋白角度研究肠上皮细胞TJ现状 　　肠上皮细胞TJ由50多种蛋白组成，分为结构蛋白和功能蛋白，结构蛋白主要有Occludin、Claudin和JAM等，构成TJ的结构骨架；功能蛋白主要有ZO-1、ZO-2、ZO-3、Cingulin和Zonulin等，连接细胞骨架及膜蛋白，并传递信号[1]。目前，国内外研究的焦点是Occludin、Claudin、ZOs和Zonulin。 　　1.1 Occludin蛋白 　　Occludin蛋白是在TJ中第一个被发现的蛋白，其为4分子交联体蛋白，2个环分布在细胞外，N端和C端分布在细胞内，相对分子量为65 000[3]。Occludin蛋白是TJ的主要组成部分，其4次跨膜结构能够和Claudin-l、Claudin-2及其他外周膜蛋白结合[4]，对维持TJ的结构和功能具有重要意义[5]。研究发现，在炎症性肠病中，肠黏膜Occludin蛋白表达水平下降[6]。Occludin蛋白可增强成纤维细胞间的黏附性，增加跨膜电阻[7]，调节细胞间的通透性[8]。乳酸杆菌等益生菌干预大肠埃希菌（E. coli）感染的小肠上皮细胞，使Occludin蛋白和细胞骨架蛋白表达升高，从而修复了破坏的TJ[9]。研究表明，肠致病菌及其毒素通过下调Occludin蛋白表达的途径破坏TJ结构[10]。 　　1.2 Claudin蛋白 　　Claudin蛋白家族对TJ结构起到支柱作用[11]。Claudin蛋白参与了TJ上只允许离子和小分子物质通过的小“孔”的形成[8]。缺少Claudin-1的小鼠在出生数小时内因脱水而死亡，研究表明，表皮屏障因缺少Claudin-1而导致功能失常，水分由皮肤大量流失，进而引发小鼠死亡[12]。细胞转染试验也进一步证实了这一结论[13]。实验表明，缺少Claudin-1表达会使肠道屏障受损[14]。杨丽等[15]用应激因子肾上腺皮质激素释放因子（corticotrophin-releasingfactor，CRF）诱导了肠上皮细胞TJ相关蛋白Claudin-2表达升高，并且发现这种诱导作用与核转录因子κB（nuclear factor kappa B，NF-κB）激活有关。 　　1.3 ZOs蛋白 　　ZOs是外周膜蛋白，能够与细胞质内Occludin蛋白的末端连接，与Occl