肿瘤浸润树突状细胞在胃腺癌分布与COX2表达相关性研究.docVIP

肿瘤浸润树突状细胞在胃腺癌分布与COX2表达相关性研究 　　【摘要】目的：探讨肿瘤浸润树突状细胞( tumor infiltrating dendritic cells, TIDC)在胃癌组织中的分布及COX-2表达与预后相关因素的意义。方法：将S-100蛋白抗体作为TIDC的特异性标记物,对60例胃腺癌标本进行免疫组化染色,对TIDC进行定量计数分析，同时COX-2表达进行检测。结果:60例肿瘤患者中树突状细胞平均值为(10.16±7.84)/mm2。树突状细胞浸润密度与年龄、肿瘤分化程度无关，与肿瘤浸润深度无明显相关。树突状细胞浸润密度随临床分期的增加而明显减少(P0.05)，进展期胃癌较早期胃癌明显减少(P0.05)，有淋巴结转移的胃癌组低于无淋巴结转移的胃癌组(P0.05)，COX-2表达阳性的胃癌组树突状细胞浸润密度低于COX-2表达阴性的胃癌组(P0.05)。COX-2表达与年龄、肿瘤分化程度无关，与肿瘤浸润深度无明显相关。COX-2表达在早期胃癌组明显低于进展期胃癌组(P0.05)，COX-2表达随临床分期的增加而明显增加(P0.05)，有淋巴结转移的胃癌组表达明显高于无淋巴结转移的胃癌组(P0.05)。结论：肿瘤树突状细胞的浸润密度与TNM分期、淋巴结转移、COX-2表达有明显相关性，检测胃癌组织内TIDC浸润程度及COX-2表达对判断胃癌预后有一定意义。 　　【关键词】胃腺癌;肿瘤浸润树突状细胞(TIDC);S-100蛋白 　　【中图分类号】R735.2【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2009)12-0028-01 　　 　　目前研究表明树突状细胞(dendritic cell,DC) 作为一类重要的抗原呈递细胞, 在机体抗肿瘤免疫反应过程中发挥其独特的作用。[1]近来有关DC 的研究越来越多, 尤其在DC 与各种肿瘤的临床病理特征及预后的关系和以DC为基础的免疫治疗方面已成为国内外研究的热点,并且已取得一些初步成果。环氧化酶2(cyclooxygenase2,COX-2)是前列腺合成的限速酶,与消化道肿瘤的发生关系密切[1,2]。我们采用S-100蛋白免疫组化检测胃癌患者肿瘤组织中TIDC浸润情况及检测胃腺癌环氧化酶2(COX-2)的表达,探讨TIDC数量COX-2的表达与胃癌相关预后因素的关系。 　　 　　1资料与方法 　　 　　1.1材料收集2005年～2008年在我院外科行根治性胃大部或全胃切除术治疗的胃癌患者60例。术前均未接受放化疗、免疫治疗,影像学检查未发现其他脏器转移,根治手术标本残端及切缘未见有残留癌,病理诊断均为胃腺癌,60例中年龄在30岁～82岁,其中早期胃癌15例，进展期胃癌45例。男38例,女22例。肿瘤分期和分级依据ICC1997年标准。组织切片选择标准:经有经验的两位病理科医师复核确认。S-100蛋白多抗、COX-2单克隆抗体试剂盒购自迈新生物技术有限公司。 　　1．2S-100和COX-2免疫组化染色方法及阳性结果判定标准采用二步法。胃癌石蜡标本制成4μm厚的切片,二甲苯脱蜡,酒精梯度水化。切片置于10mM的柠檬酸缓冲液中(pH6.0)煮20分钟,然后室温冷却20分钟。切片用3%H2O2处理5分钟。后续步骤按照福州迈新生物技术有限公司试剂盒说明书操作。 　　1．3阳性细胞核和细胞浆均为黄染低倍镜下选取癌细胞密集区,更换高倍镜400倍,计数10个高倍视野中TIDC总数,取均值。借助计算机辅助图像分析系统测定,每个标本在同一放大倍数下检测(×400,Olympus),镜下随机取3个视野。每个标本内树突状细胞按每平方毫米数目表示(DCs/mm2)。COX-2阳性表达为细胞胞质内出现棕黄色颗粒,光镜下(X400)随机选取10个视野,每个视野计数100个细胞,取其均值,10%判断为阳性。 　　1.4统计学分析统计方法：使用SPSS for windows 统计软件包进行统计学分析。对计量资料采用t检验，对计数资料采用卡方检验。 　　 　　2结果 　　 　　2.1肿瘤树突状细胞浸润密度与胃癌各临床病理指标关系60胃癌组织中,树突状细胞浸润的密度范围(0～22)/mm2,平均为(10.16±7.84/mm2)。5%的患者无树突状细胞浸润。以60胃癌组织中树突状细胞浸润密度的平均值10.16±7.84/mm2,肿瘤树突状细胞浸润密度与年龄、肿瘤分化程度无关、与肿瘤浸润深度无明显相关,与TNM分期、淋巴结转移有明显相关性,早期胃癌组树突状细胞浸润的密度明显高于进展期胃癌组,两者有显差异，P0.05。 　　2．2COX-2表达与胃癌各临床病理指标关系见表1。 　　 　　3讨论 　　 　　DC是一种抗原呈递细胞(antigen presen