美洲大蠊提取物CⅡ―3对家兔血常规及抗氧化活性影响.docVIP

美洲大蠊提取物CⅡ―3对家兔血常规及抗氧化活性影响 　　【摘 要】 目的：研究美洲大蠊提取物CⅡ-3对正常家兔血常规和血清抗氧化能力的影响。方法：给予正常家兔高（16mg/kg）、中（8mg/kg）、低（4mg/kg）耳缘静脉注射CⅡ-3，对各剂量组血常规和血清中抗氧化因子活性进行测定。结果：单次给药后，高剂量CⅡ-3能够明显降低正常家兔血液中白细胞、红细胞的数量（P005）；多次给药后，与NS组比较，CⅡ-3对CAT、MPO的含量及T-AOC活性均有一定的提高作用（P005）。结论：美洲大蠊提取物CⅡ-3具有一定的抗炎和抗氧化活性。 　　【关键词】 美洲大蠊；血常规；抗炎；抗氧化 　　【中图分类号】R967 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2016）23-0036-03 　　美洲大蠊（Periplaneta americana L.）为蜚蠊目蜚蠊科昆虫，俗称蟑螂。据《本草纲目》记载，蟑螂以干燥或新鲜全体入药，有活血化瘀、解毒消疳、利水消肿等功效[1]。自20世纪70年代以来，国内外学者从其体内分离纯化出多种活性物质，如与组织再生有关的p10蛋白[2]、促进血细胞吸收感染细菌的防御型分子脂多糖结合蛋白[3]以及具有利尿作用的多肽[4]等。并开发了美洲大蠊系列昆虫药品，如康复新液、心脉隆注射液和肝龙胶囊等[5]。实验通过测定美洲大蠊醇提取物CⅡ-3对家兔外周血细胞因子和血清液中抗氧化因子的含量，进一步阐明美洲大蠊的抗炎及抗氧化作用，为其进一步研究提供参考。 　　1 仪器与材料 　　11 美洲大蠊提取物的制备 受试药物CⅡ-3（批号由大理大学药学院刘光明教授提供）为棕褐色冻干粉末，其制备过程如下：用溶剂提取粉碎后的美洲大蠊虫体干品，浓缩回收溶剂，得到的浓缩液经大孔吸附树脂材料柱层析，水洗，然后用醇溶剂洗脱，所得洗脱液经减压浓缩至无醇味，干燥后得到产品CⅡ-3[6]。实验前受试药物用生理盐水分别配制成不同浓度的药液，然后用022 μm的微孔滤膜进行过滤灭菌。 　　12 动物与试剂 家兔42只，体重15～20kg，由大理大学实验动物中心提供，许可证号SYXK（滇）2011-0004，普通级别。过氧化氢酶（CAT，批号、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px，批号、髓过氧化物酶（MPO，批号、总抗氧化能力（T-AOC，批号等试剂盒均购自南京建成生物工程研究所；XFA6000动物血细胞分析仪用稀释液（批号：PD1501）、HB探针清洗液（批号：PB9407）；ANI-3D溶血剂（批号：PF2402）；HB含酶清洗液（批号：PB7501）等购自南京普朗医疗设备有限公司。 　　13 仪器 TL-16R高速冷冻离心机（上海市离心机机械研究所）；EMP-168G半自动生化分析仪（深圳市恩普电子技术有限公司）；XFA6000全自动动物血细胞分析仪（南京普朗医疗设备有限公司）。 　　2 方法 　　21 单次给药对家兔血细胞含量的影响 体重15～20kg健康雄性家兔18只，随机分为3组，每组6只，即CⅡ-3高（16mg/kg）、中（8mg/kg）、低（4mg/kg）剂量组。各组家兔按给药量2mL/kg通过耳缘静脉给药1次，分别于给药前，给药后5、15、30、60、120、240min耳缘静脉采血20μL，全自动血细胞分析仪上检测不同时间点家兔血液中白细胞、红细胞、血小板等含量的变化。 　　22 连续给药对家兔血清中抗氧化因子含量的影响 体重15～20kg健康雄性家兔24只，按体重随机分为4组，每组6只，分别为3个给药组（与21中相同）和1个生理盐水对照组（NS组）。给药组家兔每日耳缘静脉给药，给药量均为2mL/kg，NS组给予生理盐水，连续给药5d。末次给药后24 h，心脏采血5 mL，并分离血清，参照试剂盒说明书分别测定血清中过氧化氢酶（Catalase；CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（Myeloperoxidase；GSH-PX）、髓过氧化物酶（Myeloperodidase；MPO）的含量以及血清总抗氧化能力（Total Antioxidant Capacity ；T-AOC）的活性。 　　23 数据分析 采用SPSS170分析软件进行统计学分析，数据用均数±标准差（x±s）表示，单次给药数据采用配对t检验，多次给药数据均数的比较用单因素方差分析，P005为差异具有统计学意义。 　　3 结果 　　31 单次给药美洲大蠊提取物CⅡ-3对家兔血细胞含量的影响 　　311 单次给药后CⅡ-3对家兔白细胞含量的影响 与给药前比较，给药后30、60min时，高剂量组家兔血液中白细胞含量明显降低，差异有统计学意义（P