苦参地龙纳米乳凝胶制备及其离体透皮吸收研究.docVIP

苦参地龙纳米乳凝胶制备及其离体透皮吸收研究 　　[摘要] 目的：制备苦参地龙纳米乳和纳米乳凝胶剂，并对其含量、理化性质和体外透皮特性进行考察。方法：将苦参总碱溶入油相IPM，加入表面活性剂EL35、助表面活性剂无水乙醇溶解混合为含药内相，恒温搅拌至均匀；将地龙提取物溶于去离子水中，在室温下边搅拌边缓慢滴加到含药内相中，恒速搅拌至澄清透明，得苦参地龙纳米乳。采用HPLC测定纳米乳中苦参碱和氧化苦参碱的含量；采用透射电镜和激光粒径测定仪分别考察纳米乳的形态和粒径。以NP700为基质，制备苦参地龙纳米乳凝胶，并采用Franz扩散池对纳米乳、纳米乳凝胶的体外透皮特性进行考察。结果：制备的苦参地龙纳米乳为O/W型微乳，外观圆整、均匀，粒径20.6 nm，含量稳定。苦参地龙纳米乳、苦参地龙纳米乳凝胶、苦参地龙水溶液、苦参地龙水凝胶的稳态渗透速率分别为0.148 4，0.118 3，0.030 6，0.032 1 mg·cm-2·h-1。结论：苦参地龙纳米乳、纳米乳凝胶的24 h累积渗透量和渗透速率均优于水溶液、水凝胶，可为苦参地龙药对经皮给药提供一种新的剂型。 　　[关键词] 苦参；地龙；纳米乳凝胶；制备；透皮吸收 　　[收稿日期] 2013-03-13 　　[基金项目] 中药制药过程新技术国家重点实验室开放基金项目（SKL2010M0302）；北京中医药大学复方中药制药研究创新团队项目（2011-CXTD-13）；北京中医药大学自主选题项目（2011-JYBZZ-JS048）； 　　[通信作者] *王英姿，副教授，硕士生导师，主要从事中药新剂型与新技术研究，Tel：（010E-mail：wangyzi@ 　　[作者简介] 贺葵邦，硕士研究生，E-mail：hkb0723@126.com 苦参、地龙药对始见于陈士铎《辨证录》，是清热解毒、息风止痉的有效方，苦参苦寒，地龙咸寒，二药相伍为用，取苦参之清热燥湿和地龙之清热通络，可有效治疗烧烫伤以及湿疹、皮肤瘙痒和下肢溃疡等皮肤病，特别对于有轻微破损的皮肤也可适用[1-2]。临床常将其制成外用洗剂使用，但传统水煎剂使用的不便限制了其应用，且其有效部位生物碱类成分皮肤渗透性不佳，影响其疗效的发挥。 　　纳米乳（nanoemulsion，NE）作为一种非常有前景的经皮给药载体，为解决难溶性药物的经皮??收提供了一种新的途径。纳米乳作为经皮给药载体，具有增加药物的溶解度、提高药物的透皮速率、提高药物稳定性、延长药物作用时间、维持恒定血药浓度等优点，因此日益受到研究者的重视。 　　因此，本研究将2味药进行提取纯化得到有效部位，制备纳米乳，并对其含量和理化性质进行了考察。为了提高纳米乳的黏度，方便给药，进一步将其制备成纳米乳凝胶剂（nanoemulsion-based gels，NBGs），提高其透皮效率和治疗效果，为苦参地龙药对的临床应用提供一种新的给药载体。 　　1 材料 　　LC-20AT型高效液相色谱仪（SIL-20A型自动进样器，SPD-20A型紫外-可见检测器，日本岛津公司）；BSI10S型1/1万电子分析天平（赛多利斯仪器系统有限公司）；TK-12D型透皮扩散试验仪（上海锴凯科技贸易有限公司）；KH7200DB型数控超声波清洗器（昆山超声仪器有限公司）；DL-5-B型离心机（上海安亭科学仪器有限公司）；HJ-6A多头磁力搅拌器（常州国华电器有限公司）。 　　苦参总碱提取物购自宁夏紫荆花制药有限公司；地龙提取物（实验室自制，出膏率4.08%）；苦参碱、氧化苦参碱对照品（中国食品药品检定研究院，批号分别为11805-200508，110780-201007）；甲醇、乙腈（色谱纯，Fisher公司）；磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、无水乙醇（北京化工公司）；肉豆蔻酸异丙酯，IPM（国药集团化学试剂有限公司）；聚氧乙烯35蓖麻油（EL35，北京凤礼精求商贸有限责任公司）；其余试剂均为分析纯。 　　SD大鼠，雄性，体重180～200 g，北京维通利华实验动物技术有限公司提供，动物许可证号SCXK（京）2012-0001。 　　2 方法与结果 　　2.1 苦参碱、氧化苦参碱含量的测定 　　2.1.1 色谱条件 Agilent Technologies Zorbax Extend C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；柱温35 ℃；进样量10 μL；流动相乙腈（A）-甲醇（B）-磷酸盐缓冲液（pH 6.8，C）（11∶11∶78）[3-4]，流速1.0 mL·min-1；检测波长220 nm。此条件下苦参碱、氧化苦参碱混合对照品溶液与样品溶液的HPLC图见图1。 　　1. 氧化苦参碱；2. 苦参碱。 　　图1 混合对照溶液（A）和苦参地龙样品