艾灸对d半乳糖致衰老大鼠松果体氧化损伤影响的实验研究-针灸推拿学专业论文.docx

I I 成都中医药大学博士学位论文 中文摘要 目的 为进一步深入探讨艾灸延缓衰老机理，以 D-半乳糖致衰老大鼠为研究对 象，以中医衰老理论为指导，以现代衰老松果体学说为切入点，通过观察艾灸对 D-半乳糖致衰老大鼠松果体中 SODmRNA 表达、HSP70 表达、LF 含量、松果体细胞 数的影响，探讨了艾灸对 D-半乳糖致衰老大鼠松果体氧化损伤的干预作用，从 分子转录及表达水平深入揭示艾灸延缓衰老机理，为艾灸延缓衰老应用于临床提 供新的实验依据。 方法 实验大鼠随机分为空白组、模型组、模型+艾灸组，空白组每日颈部皮下 注射生理盐水 1 次，模型组每日颈部皮下注射 D-半乳糖溶液 1 次，模型+艾灸组 在每日颈部皮下注射 D-半乳糖溶液后，选用双侧脾俞、肾俞进行艾灸治疗，连 续治疗 6 周，6 周结束时，采集松果体，经固定、包埋、组织切片处理后，采用 原位杂交技术、多克隆抗体免疫组化技术及组织化学染色技术，分别测定各组大 鼠松果体 SODmRNA 表达、HSP70 表达、LF 含量、松果体细胞数，应用病理图文图 像分析系统及细胞医学图像分析系统对结果进行图像采集及分析处理。 结果 1 与空白组相比，模型组大鼠松果体中 SODmRNA 及 HSP70 表达显著降低 （P0.001， P0.01)、LF 明显含量增加（P0.001）、松果体细胞数显著减少 （P0.001）。 2 与模型组相比，模灸组大鼠松果体中 SODmRNA 及 HSP70 表达显 著增加(P0.01，P0.05)、 LF 含量显著减少(P 0.001)、松果体细胞数显著增 多（P0.01 ）。 结论 1 艾灸可以在分子转录、表达水平上影响机体衰老过程中松果体的氧化损 伤，其可能的作用机理是：艾灸通过减缓 LF 在松果体中沉积，上调松果体中 SODmRNA 及 HSP70 的表达而干预松果体的氧化损伤，进而延缓松果体衰退进程。 2 艾灸通过对松果体氧化损伤的干预作用，减缓机体衰老过程中松果体细胞减少 的速度，在一定程度上维持松果体的正常形态及功能，从而延缓松果体衰老。这 可能是艾灸延缓衰老的又一作用机理。 关键词： 衰老；松果体；氧化损伤；艾灸；延缓衰老；作用机理 II II 成都中医药大学博士学位论文 Abstract Purpose: To study the mechanism of moxibustion on slowing down the process of aging more profoundly, taking D- galators induced aged rats as observe goals, taking the TCM aging theory as instruction, taking the modern aging hypothesis of pineal gland as basis, by observing the effect of moxibustion on the expression of SODmRNA and HSP70, the amount of LF and the quantity of pinealocyte in pineal gland of D- galators induced aged rats, studying the interference role of moxibustion on oxidation derogation in pineal gland. Then explain the mechanism of moxibustion on slowing down the process of aging more profoundly on the level of molecule transcription and expression, providing new experimental basis for the clinical treatment of moxibustion on slowing down the process of aging. Methods: Dividing the exprimemtal rats into control group, model groups , model combined moxibustion group, randomly. Dealing control group rats with hypodermic injecting 0.9% normal seline once everyday；deal model group rat