茉莉酸甲酯对高温胁迫生物蚕食无花果幼苗影响.docVIP

茉莉酸甲酯对高温胁迫生物蚕食无花果幼苗影响 　　摘要：以波姬红无花果为试材，40 ℃高温胁迫经茉莉酸甲酯处理的无花果幼苗，分析与抗逆相关的超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）、茉莉酸合成路径中脂氧合酶（LOX）活性变化及丙二醛、脯氨酸、多酚含量，同时，采用黑绒金龟蚕食伤害经茉莉酸甲酯处理的无花果幼苗，分析与生物胁迫相关的多酚氧化酶（PPO）、苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性变化及单宁、胰蛋白酶抑制素含量。结果表明，高温胁迫经50 μmol/L茉莉酸甲酯处理的无花果幼苗，其SOD、POD、CAT活性与未用茉莉酸甲酯处理（对照）相比有显著增加，脯氨酸、多酚含量提高，丙二醛含量降低；生物蚕食经50 μmol/L茉莉酸甲酯处理的幼苗叶片，其PPO、PAL活性增加，单宁、胰蛋白酶抑制素含量提高。经茉莉酸甲酯处理的无花果幼苗，高温胁迫、生物蚕食能通过增加SOD、POD、CAT活性抵御非生物逆境的胁迫，通过提高PPO、PAL活性增强对生物胁迫的抗性。 　　关键词：无花果；抗逆；茉莉酸甲酯；超氧化物歧化酶；过氧化物酶；多酚氧化酶；高温胁迫；生物蚕食 　　中图分类号： S663.301 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2017）20-0138-06 　　无花果（Ficus carica L.）为桑科榕属多年生落叶灌木或小乔木，原产于亚洲西部，目前我国各地均有栽培，尤以新疆维吾尔自治区南部、广东、福建沿海地区、江浙一带及胶东半岛栽培较多，北京以南的内陆地区近些年无花果栽培面积也迅速增加，北京以北地区因天气寒冷，若栽培无花果须采用温室大棚等设施进行越冬。无花果栽培面积的不断扩大导致需苗量越来越大，而植物生长调节剂研究应用可为无花果的广泛栽培提供理论指导[1]。 　　茉莉酸甲酯（MeJA）是通过硬脂酸途径产生的脂肪酸衍生物，广泛存在于各类植物中[2]。当植物受到创伤、昆虫咬食或病原菌侵染等引发局部及系统性的伤害信号时，会产生茉莉酸甲酯等茉莉酸类物质，进而提高植物本身的抗性[3]。茉莉酸甲酯对植物的调节作用主要体现在2个方面：一是调节植物种子萌发、花粉发育、衰老等生长发育，二是调节植物伤害应答、抵抗病原菌侵袭等防御系统，并在转录水平上影响植物次生代谢[4]。茉莉酸类物质诱导植物次生代?x物含量的增加，主要是以信号分子的形式参与到植物次生代谢过程中，调控相关关键酶基因的表达，影响关键酶活性，从而对次生代谢物的产生进行调控[5]，茉莉酸类物质在植物抵御逆境胁迫上起着关键作用。本研究利用茉莉酸甲酯处理经高温胁迫、生物蚕食的无花果幼苗叶片，进行抗逆酶活性分析，为茉莉酸甲酯在无花果中的应用提供理论基础。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　试验用外植体为波姬红无花果幼嫩枝条，2014年3月采自江苏省句容市江苏农林职业技术学院。试验用试剂为 6-苄基腺嘌呤（6-BA）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）、赤霉素（GA）、2% NaClO、0.1% HgCl2、75%乙醇、蔗糖、琼脂、MS培养基等。茉莉酸甲酯用适量的无水乙醇溶解，加入Tween-80乳化，并用蒸馏水定容，使Tween-80终浓度为1%。 　　1.2 无花果幼苗的扩繁 　　将无花果幼嫩枝条茎段接种培养30 d，将初始培养基上分化、生长健壮的芽切下，接种于MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+GA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂8.0 g/L（pH值5.8）的壮苗培养基上培养30 d，再将生长健壮的无花果组培苗接入生根培养基进行生根培养。培养条件为温度25 ℃、光照度2 000 lx、光照时间14 h/d。 　　1.3 无花果幼苗的移植与试验处理 　　将无菌的波姬红无花果组培苗移栽到装有营养土 ∶ 蛭石为1 ∶ 1的营养钵中，选取4叶株龄的高度、长势、叶色基本一致的幼苗置于培养箱内培养1周，温度为25 ℃、光照度为 2 000 lx、光照时间为14 h/d、相对湿度为70%～80%，其间正常浇水；采用50 μmol/L茉莉酸甲酯溶液均匀喷施无花果幼苗的叶表面和叶背，至药液欲滴为度，以喷施相同浓度乙醇和Tween-80、不含茉莉酸甲酯的水溶液为对照，光照培养箱内培养1 d。一部分幼苗于40 ℃高温胁迫1 d，取出，置于适宜环境中自然生长，并在胁迫前（0 d）及胁迫后、1、2、3、4 d 采集叶样；另一部分幼苗用黑绒金龟蚕食叶片进行生物胁迫，分别于处理后0、1、2、3、4 d采集叶样，重复4次，每重复12株苗。叶片洗净，用蒸馏水冲洗，吸水纸吸干，去除粗大的主叶脉，待测。 　　1.4 生理指标的测定 　　1.4.1 丙二醛 参照孔祥生等的方法[6]采用硫代巴比妥酸（TBA）法测定丙二醛含量：吸