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芝麻籽粒脂肪含量核磁共振无损快速测定方法建立 　　摘要：以冷榨芝麻油为标样，制作出核磁共振检测芝麻脂肪含量的标准曲线，建立了核磁共振无损快速测定芝麻籽粒脂肪含量的方法（简称核磁共振法，NMR）。分别采用索氏提取法和核磁共振仪检测方法，测定了50份国内外芝麻种质资源籽粒的脂肪含量，对这2种方法测定值进行比较分析结果表明，利用NMR法与索氏提取法测定的结果同样稳定，籽粒脂肪含量范围在29.48%～58.71%，而且2组测定结果极显著相关（系数为r=0.991 8），测定值的绝对偏差仅为0.10～2.05百分点。与索氏抽提法相比，核磁共振法可保证籽粒不破损，而且操作简便、快速，所测数据准确、可靠，不受种子含水量、种皮色等因素的影响。因此，该方法在今后芝麻籽粒脂肪含量快速测定和品质性状研究中具有广泛的应用前景。 　　关键词：芝麻；脂肪含量；索氏提取法；核磁共振法 　　中图分类号： O482.53+2；S565.301文献标志码： 　　文章编号：1002-1302（2016）08-0386-03 　　芝麻是我国重要的优质油料作物，其种子含油量45%～58%，还含有丰富的蛋白质、氨基酸、维生素、芝麻酚等营养物质，是人类最为理想的植物油脂之一。芝麻籽粒脂肪含量高低是评价其品质的重要指标，也是遗传育种研究工作者最?P注的品质性状。在芝麻籽粒品质分析中，多采用索氏提取法（GB/T 14772―2008《食品中粗脂肪的测定》）这一经典的方法测定芝麻种子脂肪含量。该方法测定结果准确性较高，但操作过程繁琐、周期长、成本高，而且需要破损磨碎待测样品，样品用量较大，极大地限制了芝麻优质育种的工作开展[1]。近10年来，核磁共振技术（nuclear magnetic resonance，NMR）得到了不断发展和完善，并已成功用于大豆、花生、油菜、棉花、玉米等作物籽粒脂肪含量测定[2-6]。该技术是基于原子核磁性的一种技术，可用于快速定量分析检测样品，对样品不具破坏性，而且简便、灵敏度高[7-8]。目前，国内外尚未见有关利用核磁共振技术进行芝麻种子脂肪含量测定的研究报道。因此，本研究拟定以冷榨芝麻油为标样，建立NMR检测芝麻籽粒脂肪含量的标准曲线，比较NMR与索氏提取法在芝麻籽粒含油量分析中的优劣性，以期建立芝麻脂肪含量核磁共振无损快速测定方法。 　　1材料与方法 　　1.1供试材料 　　从2012年芝麻资源南繁材料中选用国内外不同地区的芝麻种质材料50份，编号见表1，其中包括白芝麻25份，黑芝麻10份，中间色（黄、灰、褐、棕等）芝麻材料15份。 　　1.2索氏提取法测定芝麻籽粒脂肪含量 　　分别选择HNZM01～HNZM50样品饱满籽粒10 g，2012年委托农业部农产品质量监督检验测试中心（郑州），采用国家质量技术监督局颁布的标准方法――索氏提取法[9]测定籽粒脂肪含量，每样重复测定3次，用于计算样品脂肪含量的“平均值±标准误”。所用化学试剂为国产分析纯。 　　1.3核磁共振法测定芝麻籽粒脂肪含量 　　在选用冷榨芝麻油做标样制作NMR法标准曲线的基础上，分别选择HNZM01～HNZM50样品饱满籽粒2 g，利用NMI20核磁共振成像分析仪（上海纽迈电子科技有限公司生产）测定各样品的核磁信号强度，再通过标准曲线计算出样品籽粒脂肪含量。每样重复测定3次，用于计算样品脂肪含量的“平均值±标准误”。 　　2结果与分析 　　2.1核磁共振法标准曲线的制定 　　本试验选用优质芝麻，首先通过冷榨获得纯正的芝麻油样品，再分别取冷榨芝麻油配制7个不同脂肪含量的标样，脂肪含量分别为0、42.31%、51.22%、62.51%、75.23%、89.22%、99.83%，然后利用NMI20核磁共振成像分析仪对各标样进行核磁信号检测，根据不同标样脂肪含量与核磁信号强度制作出NMR法标准曲线（图1），该标准曲线的回归方程为y=29.754x-18.774，r2=1，表明标样中芝麻脂肪含量与核磁信号强度呈显著的线性关系。 　　2.2核磁共振法和索氏提取法测定芝麻籽粒脂肪含量结果的比较 　　分别选用核磁共振法（NMR）与索氏提取法，对50份芝麻种质资源籽粒中脂肪含量进行了检测，结果见表1。在索氏[CM（25]抽提法测定结果中，50份芝麻种质籽粒脂肪含量范围为[CM）] 　　30.50%～58.41%，样品具有广泛的代表性。 　　在NMR检测结果中，50份芝麻种质籽粒脂肪含量的范围为29.48%～58.71%，与索氏抽提法结果的差值范围为 -1.06～2.05百分点，最小偏差为0.10百分点。从这2组测定值比较分析的结果还可以看出，具有极端（高、低）脂肪含量的6个芝麻种质脂肪含量排序完全相同。其中，脂肪含量最高的3个芝麻材料分别为HNZM02[58