胶体金RPR两种筛查梅毒抗体方法对比与应用分析.docVIP

胶体金RPR两种筛查梅毒抗体方法对比与应用分析 　　[摘要] 目的 为了比较胶体金（Collodal Gold TPCG）与快速血浆反应素环状卡片试验（ RPR）法筛查梅毒抗体区别与联系，以便对这两种方法有更明确的认识，合理选择检测方法，减少误诊与漏诊。方法 2013年该院门诊和住院患者中需要检测梅毒抗体的标本，先用TPPA法检测，TPPA法检测出的阳性标本322例，再同时进行TPCG法和用RPR滴度检测。结果 322例TPPA法阳性标本中TPCG法320例，阴性2例；RPR阳性114例，阴性208例。在TPPA阳性的标本中TPCG和RPR阳性率有显著性差异，TPCG阳性率高于RPR。结论 TPCG法比较RPR更适合医院筛查，尤其是基层医院。 　　[关键词] 梅毒抗体；TPCG；RPR；TPPA；梅毒筛查 　　[中图分类号] R [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2014）12（c）-0169-02 　　梅毒是由苍白螺旋体感染所致的系统性传播疾病，其次是母婴传播及血液传播。目前临床对梅毒的诊断除了临床症状以外，更依赖于实验室诊断。实验室检测梅毒感染的方法很多，比较常用的筛查方法有RPR、TPCG，酶联，发光法等，确证TPPA、TPHA和免疫印迹法较为常用。RPR和TPCG法由于实验要求低，操作简便，作为筛查方法被广泛应用，尤其是基层医院。选自该院2013年住院及门诊检测梅毒项目的血清样本，并用上术两种方法进行检测，为了对这两种筛查方法有更明确的认识，合理应用于临床，减少误诊与漏诊的发生，对两种方法进行比较，现报道如下。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　标本选自该院住院及门诊检测梅毒项目的血清标本，均24 h内进行检测。 　　1.2 试剂与仪器 　　梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验诊断试剂盒，试剂均当天配置或在4～8℃冰箱保存并24 h内用于检测；TPCG法梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒；RPR试剂；移液器经质检部门校准。 　　1.3 实验方法 　　对该院住院需要首次用TPPA法检测梅毒抗体的患者，抽取静脉血并分离血清，用TPPA法定性检测，对检测阳性的血清标本，再用TPCG法和RPR法同时检测。 　　1.4 实验操作及结果判断 　　严格按操作说明书完成。TPPA法以1：80为判断阴阳性的标准，以标准反应板为判断阴阳性依据。TPCG法在胶体金试纸平放，在加样区加100 uL样本，20 min观察结果，两条紫红色线者为阳性，仅有对照线一条线者为阴性。RPR法进行原倍-1：32的滴度检测，滴度大于等于原倍者凝集者记作阳性，各滴度均不凝集者记作阴性。 　　1.5 统计方法 　　应用SPSS17.0软件进行数据统计与分析，计数资料采用χ2检验，P0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　（1）结果 结果见表1。322例TPPA法阳性标本320例，阴性2例（稀释后复检仍阴性，无前带现象），与TPHA符合度99.38%，；RPR阳性114例，阴性208例，与TPPA符合度35.40%。TPCG法和RPR法结果差异有统计学意义（χ2=206，P0.005），其中2例RPR出现了前带现象，分别在1：2和1：4时阳性。 　　表1 TPCG和RPR复查322例TPPA阳性标本的结果 　　4 讨论 　　梅毒血清学检测根据不同抗原类型可分为非特异类脂质抗原试验和特异性螺旋体试验两大类。RPR法所用的抗原为心磷脂， 卵磷脂和胆固醇的混合物， 主要用于检测血清中的反应素； TPCG法是应用现代生物工程技术制备的高度纯化的单克隆梅毒螺旋体的基因工程抗原，高度选择地找寻与之相结合的抗体的原理，是一种将TPAb标记技术、免疫检测技术和层析分析技术等多种方法有机结合在一起的固相标记免疫检测技术，当金标蛋白在相应的配体处大量聚集时，在反应区肉眼可见红色或粉红线，检测的是血清中特异性抗体。 　　322例TPPA法阳性标本，用TPCG法复查阳性320例，2例阴性，阳性符合度99.38%，以TPPA法为金标准，TPCG法漏检率为0.343%（2/322），与TPPA相比阳性符合度95%，这与一些结论不同[1-3]。RPR滴度阳性114例，与TPPA相比阳性符合度35.40%。TPCG法和RPR法相比检测结果存在显著性差异。TPCG法与TPPA的符合率高于RPR法。这主要是TPPA法和TPCG法均检测的是特异性抗体，为同一种抗体，TPPA法明胶颗粒上包被的是梅毒螺旋体总抗原，检测的梅毒螺旋体的总抗体；TPCG法试纸上包被的是梅毒螺旋体的基因片段，检测的是梅毒螺旋体抗体的部分点位；而RPR检测的是梅毒螺旋体的非特异性抗体。 　　TPCG法检测在322例TPPA阳性标本中未出现抗体过多的前带现象，RPR出