胃肠外科术后肠道细菌移位临床研究.docVIP

胃肠外科术后肠道细菌移位临床研究 　　【摘 要】目的：探讨胃肠外科手术后肠黏膜屏障损伤与肠道细菌移位（BT）及BT与感染并发症之间的关系。方法：34例择期胃肠外科手术患者，于术前2h和术后2、24、48h采集外周血，进行全血细菌DNA、血D-乳酸、内毒素（LPS）浓度检测及血细菌培养。观察患者30天以监测感染并发症情况。结果：术前PCR检测全血细菌DNA均为阴性，术后共有7例阳性。术后出现全身炎症反应综合征（SIRS）的患者PCR阳性率为38·9%，无SIRS组为0%（P0·01）。PCR阳性组SIRS发生率为100%，阴性组为40·7%（P0·01）。PCR阳性者85·7%发生感染并发症，阴性者无一发生（P0·01）。术后血细菌培养阳性率5·9%，显著低于PCR的检测结果（20·6%，P0·01）；血培养阳性者，PCR检测均呈阳性。PCR阳性结果中大肠杆菌DNA占71·4%。PCR阳性的患者外周血血浆D-乳酸及LPS浓度较PCR阴性者明显升高（P0·01），且二者呈显著正相关（r=0·89，P0·01）。结论：胃肠外科术后肠黏膜屏障损伤与BT关系密切，术后早期（2h）即可发生BT，以大肠杆菌为主，术后SIRS和感染并发症与BT密切相关。 　　【关键词】外科手术；细菌移位；聚合酶链反应；乳酸；内毒素类 　　【中图分类号】R656 【文献标识码】A 【文章编号】1004—7484（2013）11—0185—02 　　胃肠外科手术与其他创伤性较大的手术一样，可引起肠黏膜屏障损害，其与术后肠道细菌移位（bactari-al translocation， BT）及感染并发症的联系值得临床关注。但目前临床上用以判断肠黏膜屏障损伤及BT的指标与方法或可行性差，或阳性率很低。本研究应用外周血D-乳酸浓度判断肠黏膜通透性，用PCR方法动态检测血中细菌DNA判断BT的情况，探讨胃肠外科手术后肠黏膜屏障损伤、BT与感染并发症之间的关系。 　　1 资料与方法 　　1.1研究对象 大中型择期胃肠外科手术34例（胃癌根治12例，小肠部分切除3例，结肠癌根治5例，直肠癌前切除6例，经腹会阴联合直肠癌根治4例，胰十二指肠切除4例），男性20例，女性14例，平均年龄43.4（34～68）岁。术前有严重全身性疾病、脏器功能障碍及严重并发症的患者不列入本研究。术前准备按常规进行。分别于术前2h和术后2、24、48h在严格无菌条件下抽取肘静脉血10ml进行检测。术后观察30天以了解全身炎症反应综合征及感染并发症的发生情况。 　　1.2检测指标 引物设计：采用靶基因为大肠杆菌特异性β半乳糖苷酶基因的BG-1、BG-4（扩增产物长度762 bp）和所有细菌共有的16S rRNA基因的高度保守区引物16S rRNA+、16S rRNA-（扩增产物长度798bp）。用细菌基因组DNA提取试剂盒（天为时代公司）提取纯菌及全血DNA进行PCR扩增，用琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物。检测指标包括：①血细菌培养：在采血行全血细菌DNA检测的同时采血以常规方法做需氧菌及厌氧菌培养；②血浆D-乳酸检测：血浆经高氯酸去蛋白后，用酶学分光光度法检测[1]；③血浆内毒素（LPS）检测：采用改良过氯酸法预处理血浆、偶氮显色法鲎试验（LAL）定量测定血浆内毒素浓度。 　　1.3术后观察指标 术后观察有无SIRS及感染并发症，包括切口、腹腔、肺部感染等。具备以下2项或2项以上体征可诊断SIRS：体温38℃或90/min；呼吸频率 20/min或PaCO212·0×109/L或0·10。1·4 统计学处理 采用Stata软件进行数据分析，计数资料采用χ2检验，计量资料采用t检验及ANOVA分析。 　　2 结果 　　2.1一般情况 术前PCR检测全血细菌DNA均为阴性，术后共有7例阳性。2例术中发生低血压（持续10～20min）者术后PCR检测均呈阳性。 　　2.2全血细菌DNA和细菌培养 术后血细菌培养阳性共2例（1株大肠杆菌，1株金黄色葡萄球菌，未检出厌氧菌），阳性率为5·9%（2/34），明显低于PCR的阳性率（20·6%，P0·01）。血细菌培养阳性者，PCR结果均阳性。PCR阳性结果中大肠杆菌DNA占71·4%（5/7）。 　　2.3术后SIRS和感染并发症 术后出现SIRS的患者PCR阳性率为38·9%（7/18），显著高于无SIRS组（0%，P0·01，）。PCR阳性组SIRS发生率100%，阴性组为40·7%，差异有显著性意义（P0·01）。发生术后感染者共6例，7个部位。PCR阳性组感染并发症发生率为85·7%（6/7），阴性组均未发生感染（0/27），二者差异有显著性意义（P0·01）。感染患者PCR检测均为阳性，最常见的感染部位为肺（3例）、腹腔（3例）