包载多西他赛 plga纳米粒体外增加肺腺癌a549细胞和鼻咽癌cne-1细胞放射敏感性的分析-肿瘤学专业论文.docxVIP

华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文  PAGE 52 中英文缩略表 英文缩写 英文全称 中文名称 聚乳酸-羟基 PLGA poly(lactic-co-glycolic acid) EPR enhanced permeability and retention effect D-α-tocopherol acid polyethylene glycol 1000 TPGS succinate 乙酸共聚物 增强渗透滞留 效应 D-α -生育酚酸 聚乙二醇 1000 琥珀酸 EE encapsulation efficiency 包封率 PBS phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲盐 FBS fetal bovine serum 胎牛血清 DCM dichloromethane 二氯甲烷 FESEM field emission scanning electron microscopy 场发射扫描电镜 3-（4，5-二甲基  MTT 3- （4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide 噻唑-2）-2，5- 二苯基四氮唑溴 盐 FCM flow cytometer 流式细胞仪 PI propidium iodide 碘化吡啶 DMSO dimethyl sulphoxide 二甲基亚砜 IC50 inhibition concentration 半数抑制浓度 SER radiosensitization sensitization enhancement ratio 放射增敏比 PE plating efficiency 接种效率 SF surviving fraction 存活分数 HPLC high performance liquid chromatography 高效液相色谱  英文缩写英文全称中文名称CLSM NPs P-gpconfocal laser scanning microscopy nanoparticles P-glycoprotein共聚焦显微镜 纳米颗粒 P 糖蛋白 包载多西他赛 PLGA 纳米粒体外增加肺腺癌 A549 细胞和鼻咽癌 CNE-1 细胞放射敏感性的研究 硕士研究生：施 伟 导 师：杨坤禹 教授 华中科技大学同济医学院附属协和医院肿瘤中心，武汉，430023 中文摘要 目的 优化纳米沉降法制备载多西他赛-聚乙酸羟基乙酸共聚物（PLGA）纳米粒过程 中的参数，体外检测其细胞毒性及放射增敏性，探讨纳米载药系统在肿瘤放射增敏中 的应用前景。 方法 应用纳米沉降法制备载多西他赛 PLGA 纳米粒，优化制备过程中的相关参数， 用激光粒度仪检测纳米粒的粒径及分布，场发射扫描电镜观察纳米粒的表面形态，zeta 电位检测表面电能，高效液相色谱检测药物包封率。MTT 法分别检测载多西他赛纳 米粒和泰素帝对 A549 及 CNE-1 细胞的增值抑制作用；共聚焦显微镜定性观察 A549 及 CNE-1 细胞对载药纳米粒的摄取情况；流式细胞仪 PI 单染法检测载药纳米粒，药 物以及放射作用后细胞周期的变化；克隆形成实验分析并比较载多西他赛纳米粒和泰 素帝对人肺腺癌细胞 A549 和人高分化鼻咽癌细胞 CNE-1 的放射增敏作用。 结果 纳米沉降法制备载多西他赛 PLGA 纳米粒的优化条件为：TPGS 浓度为 0.2wt%， 油相选择为丙酮和无水乙醇，油水相之比为 1:5，理论载药量为 5%，据此优化条件制 备出粒径 130-150nm，包封率为 40.83±2.1%，表面光滑呈球形；在 A549 及 CNE-1 细胞中，载药纳米粒对细胞的增值抑制作用明显优于泰素帝。共聚焦显微镜观察可见 细胞能够摄取载药纳米粒，载药纳米粒可进入胞浆。PI 单染法示载药纳米粒，泰素帝 及放射作用均可使 A549 及 CNE-1 细胞阻滞于 G2/M 期，单纯药物作用时载药纳米粒 阻滞效果优于泰素帝，当联合放射作用时阻滞效果更为明显。在 A549 细胞中，载多 西他赛纳米粒的放射增敏比 SER 为 1.68，而泰素帝的 SER 为 1.24；在 CNE-1 细胞中，  载多西他赛纳米粒的 SER 为 1.61，泰素帝为 1.32。 结论 利用已优化的纳米沉降法能够制备出粒径较小，包封率较高的载多西他赛 PLGA 纳米粒，此纳米粒在 A549 及 CNE-1 细胞中增殖抑制作用，G2/M 期阻滞效果均优于 泰素帝，有优于泰素帝的放射增敏作用。 关键词 癌症；放射敏感性；多西他赛；纳米沉降法；纳米粒。  Study on Radiosensitization of Docetax