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西瓜离体组织培养再生体系研究进展
西瓜离体组织培养再生体系研究进展
摘 要 阐述了西瓜离体组织培养再生体系建立过程中的一些重要影响因素,如苗龄、基因型、外植体等方面,探讨其存在的问题,并对西瓜再生体系的未来进行展望。
关键词 西瓜 ;离体组织培养 ;再生体系
分类号 S651
Research Progress of in Vitro Regeneration System of Watermelon
NIU Meili1) DANG Xuanmin2) HE Huang2) ZHAN Yuanfeng2)
(1 College of agriculture Hainan University, Haikou, Hainan 570208;
2 Tropical Crops Genetic Resources Institute, CATAS, Danzhou, Hainan 571737)
Abstract This paper expounds some important factors of the regeneration system of the tissue culture of the watermelon including seedling age, genotype, and explants, discusses some problems, and looks forward to the establishment of regeneration system of watermelon in the future.
Keywords watermelon ; tissue culture ; regeneration system
西瓜[Citrullus lanatus (Thunberg) Matsumura et Nakai]属葫芦科(Cucurbitaceae)双子叶开花植物,是我国重要的水果类经济作物,为了满足广大消费者的需求,西瓜育种技术也在不断创新。近年来,随着植物基因工程技术的迅速发展,利用转基因技术进行种质创新,培育优质、高产的抗病新品种成为西瓜遗传育种研究的热点。西瓜离体高效组培再生体系的建立是转基因成功的关键。1971年Andrus[1]首次报道,成功建立了无籽西瓜的无性繁殖体系,随后许多学者相继做了大量的研究[2-4]。
西瓜离体培养的基本原理是利用植物的再生能力及植物细胞的全能性。与大多数植物相比,西瓜的再生能力较弱,不易通过愈伤组织途径形成再生植株,而且玻璃化现象严重,移栽不易成活。因此,加强西瓜高效组织培养的研究,有助于提高转基因技术在西瓜育种方面的应用。笔者对目前西瓜离体培养再生体系的研究现状进行综述,为进一步完善西瓜再生体系提供理论基础。
1 影响西瓜离体培养再生体系建立的因素
1.1 苗龄
苗龄对于不定芽诱导率的影响较大,苗龄的不同决定着外植体生理状态的不同。Tabei[5]、Dong[6]和Compton[7]等认为,苗龄为5 d的幼苗子叶的不定芽诱导频率最高;马国斌等[8]认为,不同苗龄子叶的不定芽分化率有明显差异,2 d苗龄子叶的不定芽分化频率最高,这与王春霞等[9]的报道一致;任春梅等[10]的研究认为,刚刚由黄转绿的苗龄(4~5 d)的子叶诱导产生不定芽的频率最高,而苗龄为8~9 d的子叶诱导产生的不定芽最多;Chaturvedi等[11]则认为,7 d苗龄的子叶诱导率最高;赵彩萍等[12]认为,4~6 d苗龄子叶诱导不定芽的效率较高;袁建民[13]的研究认为,苗龄为3~5 d的子叶不定芽诱导率最高,超过5 d不定芽诱导率随之下降,10 d以上苗龄的子叶不能诱导产生不定芽;肖守华等[14]同样认为,西瓜苗龄为3~5 d子叶不定芽诱导率维持在较高水平,而且观察到此时子叶颜色由淡黄色转为浅绿色,随着子叶颜色加深,诱导率下降。因此,在西瓜离体培养中,一般多采用4~5 d苗龄的无菌苗子叶作为外植体。但是,由于不同品种的种子发育快慢存在差异,以培养的天数来确定苗龄并不合适,而以子叶颜色判断可能更加有效,无菌苗子叶呈现淡绿色时不定芽诱导率最高,这在黄学森[15]、任春梅[10]、王果萍[16]及袁建民[13]等学者的研究中都有报道。
1.2 基因型
基因型是影响植株再生的内因。选用合适的基因型材料是西瓜组织培养成功与高效的关键,不同的基因型材料诱导分化率有很大差别[4]。一些研究发现,不定芽的诱导不仅受植物激素的影响,而且跟外植体的基因型有关[4,13,17-20]。如郑先波[21]报道,基因型与愈伤组织诱导关系密切,品种黑蜜5号是最易产生愈伤组织的基因型;董焱等[22]则认为,以未成熟胚为外植体建
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