诊断超声辐照对子代大鼠生长发育及脑组织超微结构影响.docVIP

诊断超声辐照对子代大鼠生长发育及脑组织超微结构影响 　　【摘要】 目的：探讨孕期大鼠超声辐照后对子代生长发育及大脑组织超微结构的影响，从而进一步了解孕期超声检查的安全性。方法：以诊断剂量的超声辐照对孕8 d SD大鼠分别在孕8 d（早期）、孕12 d（中期）及孕16 d（晚期）进行3次时长分别为0 min（无超声辐照，正常对照组）、5、10及20 min的超声辐照后观察子代大鼠生长发育及其大脑组织超微结构的变化。结果：超声辐照20 min组子代大鼠P1、P3、P5、P7体重明显低于对照组（0 min组），差异有统计学意义（P0.05）。结论：孕期大鼠在孕早中晚期分别进行一次超声辐照，每次超?辐照时长20 min，可影响子代大鼠生长发育并引起其大脑组织超微结构发生病变。 　　【关键词】 超声辐照； 子代大鼠； 生长发育； 脑组织； 电镜技术 　　doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2017.35.030 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2017）35-0061-03 ???　随着诊断超声技术的不断发展，其在产科应用越来越广泛，目前已成为发现胚胎异常及胎儿畸形首选的检查手段。近年来，为了提高诊断准确率，超声仪器在装备技术和软件开发上日新月异，诊断超声的频率、输出功率均有大幅提高，检查时间也相应增加，其潜在危险就随之增加。因胎儿组织细胞较成人更易受超声生物效应作用，诊断超声的生物效应对胎儿各系统的安全性问题越来越受到国内外学者的关注[1-2]。本实验目的是观察孕鼠早中晚期分别接受不同时长的超声辐照后对子代大鼠生长发育和其大脑组织超微结构的影响，为临床医师在产科超声检查中更好地选择辐照时间提供资料。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验动物 　　选健康的孕8 d的SD孕鼠（350±21.3）g 16只。 　　1.2 实验仪器 　　GE Voluson E8彩色多普勒超声诊断仪，采用腹部探头频率为3～5 MHz。 　　1.3 方法 　　1.3.1 大鼠分组 孕8 d的SD孕鼠（350±21.3）g 16只随机分为四组，每组4只：对照组即无诊断超声辐照组（0 min组）；超声5 min 3次组，即应用诊断超声剂量对孕鼠腹部照射5 min，每隔4 d一次，连续3次（5 min组）；超声10 min 3次组，即应用诊断超声剂量对孕鼠腹部照射10 min，每隔4 d一次，连续3次（10 min组）；超声20 min 3次组，即应用诊断超声剂量对孕鼠腹部照射20 min，每隔4 d一次，连续3次（20 min组）。 　　而后，各组大鼠正常生产的子代依据生殖器与肛门之间的距离判断雌雄，近者为雌，远者为雄。随机取4只（雌雄各半），取脑组织进行电镜观察以对比各组孕鼠子代脑组织的超微病理变化。 　　剩余的各组孕鼠生产的子代大鼠随机抽取20只（雌雄各半）进行生长发育的观察，内容包括出生7 d内的体重变化、首次睁眼时间、双上臂悬挂持续的时间。 　　1.3.2 体重测量 分别于出生即刻P1，出生后第3天P3，出生后第5天P5，出生后第7天P7时间段称量子代大鼠体重，以克（g）为单位。 　　1.3.3 子代大鼠双眼睁开时间记录 记录子代大鼠双侧眼睛初次睁开的日龄，以天（d）为单位。 　　1.3.4 子代大鼠上臂悬挂实验 出生后2周P14子代大鼠双前脚抓住一水平金属棍（直径大约0.5 cm），距离桌面30 cm高度，记录子代大鼠双前脚抓牢金属棍后身体悬挂持续的时间，并以分钟（min）为单位计数。 　　1.3.5 子代大鼠脑组织超微结构观察 大鼠乙醚吸入麻醉后固定，开颅取大鼠脑皮质约（0.1×0.1×0.1）cm3大小的组织4小块，经3%戊二醛-1.5%多聚甲醛（PH=7.4）前固定，4 ℃过夜，磷酸缓冲液（pH=7.4）漂洗3次后1%锇酸-亚铁氰化钾溶液后固定2 h（4 ℃），标本经50%、70%、90%、100%乙醇，100%丙酮逐级脱水，环氧树脂Epon618浸透包埋，超薄切片经硝酸铅-醋酸铀双染后FEI Tecnai BioIWIN透射电镜观察。 　　1.4 统计学处理 　　应用统计软件SPSS 14.0统计包对数据进行分析，结果以（x±s）表示，采用one-way ANOVA（完全随机设计的单因素方差分析）进行统计学分析，P0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 孕鼠接受不同时长超声辐照对子代大鼠生长发育的影响 　　2.1.1 不同时长超声辐照对子代大鼠出生后1周内体重的影响 0 min组、5 min组、10 min组、20 min组子代大鼠不同日龄体重的变化见图1。超声辐照5 min组和0 min组比较差异无统计学意义（P0.05），超声辐照10 min组子代大鼠虽