实验一牙菌斑细菌检查 （口腔）.ppt

* * 口腔生物学实验 基础医学院病原生物学教研室 杨致邦 2010.1 教材 高等医学院校基础医学实验教学系列教材 ?病原生物学实验? 科学出版社，2008年6月 主编 杨致邦 叶彬 实验内容及安排 有 4 饮用水氟含量测定 3 需要 5 ELISA法检测血清HBsAg 2 需要 5 牙菌斑细菌检查 1 录像 显微镜 学时数 实验课内容 实验一 牙菌斑细菌检查(P161) [实验目的] 1.掌握牙菌斑涂片的刚果红负性染色法； 2.熟悉口腔细菌的形态，染色性； 3.了解口腔厌氧菌培养方法。 【实验内容】 1.牙菌斑刚果红负性染色检查法 2.牙菌斑细菌培养 1.牙菌斑刚果红负性染色检查法 [实验材料] 牙纤、牙垢、2%刚果红、37%的浓HCL、显微镜、载玻片、香柏油、二甲苯。 【实验方法】 (1) 标本采集 用牙纤挑取牙菌斑(牙缝接近牙龋处)的牙垢。 (2) 刚果红负性染色法 载玻片上滴加2%刚果红溶液2滴 加入标本，用牙鉴将标本与染液混匀 推 片 自然干燥 置浓HCL(37%)蒸汽上熏，呈蓝色即可 油镜观察 [实验结果] 油镜下可见背景呈蓝(黄)色、细菌及其它微生物呈光亮的白色,形态清晰,呈不同的形态：球状、杆状、螺旋状等。 [注意事项] (1) 一定要将菌斑与染液混匀，否则就不能将细菌分散。 (2) 用HCL蒸汽熏时，皮肤一定不要接触浓HCL，否则会被烧伤。 [实验材料] 1.牙纤、牙垢、硫乙醇酸盐稀释液(分装成1ml)、厌氧血平板、产气袋、金属钯、厌氧罐。 2.牙菌斑细菌培养 2.生理盐水、革蓝染色液, 显微镜、载玻片、接种环、牙纤、香柏油、二甲苯。 [实验方法] 用牙纤挑取少许牙垢 在塑料离心管中加入0.5 ml硫乙醇酸盐稀释液 震荡1-2分钟 用稀释液对倍稀释为1:10、1：20、1：40 取1：20、1：40稀释液各2-3环接种厌氧血平板 在厌氧罐中放入产气袋，加约10ml水 将接种后的厌氧血平板放入厌氧罐中，迅速盖好 37℃培养3天后观察 1.厌氧菌培养 *