实验六 粪便标本4 分组讨论.ppt

录像：厌氧菌感染 2. 学生操作： 粪便标本分离-4：药敏试验结果及生化结果观察， 氧化酶实验 完成实验记录 3. 分组讨论： 布鲁氏菌、鼠疫耶尔森菌、芽胞杆菌 实验六 粪便标本分离（4）- 药敏结果观察 药敏实验结果观察及判定 抑菌圈直径（毫米） 敏感度 20以上 ? 极敏 ? 15-20 ? 高敏 ? 10-14 ? 中敏 ? 10以下 ? 低敏 ? 0 不敏 ① 敏感（S）：表示检测菌能被测定药物常规剂量给药后在体内能达到的浓度所抑制或杀灭。即由该菌引起的感染可以用常规剂量的该抗菌药物治疗，禁忌症除外。 ② 中度敏感（MS）：表示检测菌在测定药物浓集部位的体液中（如尿液中）或大剂量给药后在体内能够达到的浓度所抑制。该药物在生理浓集部位或高于常规剂量也可有临床疗效。 ③ 中介度（I）：是介于敏感和耐药之间的缓冲区，其临床意义是不确定的。对药敏结果表现为中介度的药物，临床因特殊原因考虑要选用时，应作定量药敏试验以确证其敏感性 ④ 耐药（R）：该细菌不能被常规剂量的该抗菌药物所抑制，不能用于治疗。 1 2 4 1 2 4 1 2 4 1 2 4 ONPG GLU LDC ARA CIT ODC H2S URE IND TDA OX NO2 ONPG:2磷－硝基苯－β －D-半乳糖苷 H2S: 硫化氢 GLU: D-葡萄糖 URE：脲素酶 ARA：L-阿拉伯糖 TDA:L－色氨酸脱氨酶 LDC：L-赖氨酸脱羧酶 IND:吲哚 ODC: L-鸟氨酸脱羧酶 OX:氧化酶 CIT：柠檬酸钠 NO2:亚硝酸盐 生化反应 1. 在TDA反应槽中加入一滴TDA试剂，即可观察结果； 苯丙氨酸 2. 在IND反应槽中加入一滴吲哚试剂，即可观察结果； 靛基质 3. NO2试验：在GLU反应槽中分别加入NIT1和NIT2试剂各一滴（此为NO2反应的结果，GLU反应结果以未加试剂前为准），2－3分钟后看结果； 硝酸盐还原剂（甲、乙） 注：其中GLU反应槽包含两个反应结果，即GLU反应和NO2反应，要注意区别进行计数； 生化反应结果判断 4. 氧化酶试验：用滤纸取药敏实验平板上细菌，在滤纸上滴加OX试剂，1-2分钟后观察结果。（取铜绿假单胞菌作为阳性对照） 生化反应结果判断-续 测试 底物 分量(mg/cup) 反应/酶 结果 阴性 阳性 ONPG 2磷－硝基苯－β－D-半乳糖苷 0.223 β-半乳糖苷酶 无色 黄色 GLU D-葡萄糖 1.9 发酵/氧化 兰/兰－绿 黄、黄－灰色 ARA L-阿拉伯糖 1.9 发酵/氧化 兰/兰－绿 黄色 LDC L-赖氨酸 1.9 赖氨酸脱羧酶 黄色 橙色 ODC L-鸟氨酸 1.9 鸟氨酸脱羧酶 黄色 红/橙色 CIT 柠檬酸钠 0.756 柠檬酸利用 浅绿/黄 兰绿/兰色 H2S 硫代硫酸钠 0.075 H2S产生 无色/带灰 黑色沉淀 URE 脲素（酚红） 0.76 脲酶 黄色 红色/橙色 TDA L－色氨酸 0.38 色氨酸脱氨酶 黄色＋TDA →深褐色 IND L－色氨酸 0.19 色氨酸酶，吲哚产生 无色＋JAMES→ 粉色 OX 在滤纸上 － 细胞色素氧化酶 无色 紫色 NO2 （GLU管） － NO2产生 黄色＋NIT1+NIT2/2－3分钟 红色 7504：肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种 结果判定 1.每三项为一个数据组，并分别用1、2、4标出 2.各组阳性项的数字相加得到一个数字 3.将各组数字组合得到的数字到数据库内找到对应的细菌。 1 2 4 1 2 4 1 2 4 1 2 4 ONPG GLU LDC ARA CIT ODC H2S URE IND TDA OX NO2 ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ － － － － － ＋ 7 0 5 4 结果记录 形态及染色性 生化反应 药敏试验 菌落 革兰染色 ONPG GLU ARA LDC ODC CIT H2S URE IDA IND OX NO2 Amp 鉴定结果 鼠疫耶尔森菌 炭疽杆菌 布鲁氏菌 学生讨论