贵州早春鳝鱼血糖含量2种测定方法比较研究.docVIP

贵州早春鳝鱼血糖含量2种测定方法比较研究 　　摘要研究了早春黄鳝血糖含量的测定方法,并对2种不同测定方法进行比较。结果表明:邻甲苯胺(o―TB)法血糖含量为(2.875±0.422)mmoL/L;葡萄糖氧化酶(GOD)法血糖含量为(2.439±0.248) mmoL/L。统计分析表明,早春时节2种不同方法测定血糖含量均较低;且2种方法测定血糖含量的差异不显著(P0.05)。邻甲苯胺(o―TB)法变异较大,均数较葡萄糖氧化酶(GOD)法略偏高;葡萄糖氧化酶(GOD)法变异小,均数相对于前者略偏低。其中邻甲苯胺(o―TB)法较为理想,而在人及其他普通试验动物中测定血糖含量普遍采用的葡萄糖氧化酶(GOD)法在鳝鱼血糖测定中没有表现出较好的统计结果。 　　关键词鳝鱼;早春;血糖;测定方法;贵州省 　　中图分类号S966.4文献标识码A文章编号 1007-5739(2010)13-0348-01 　　 　　为了测定贵州野生鳝鱼越冬至春季开食前血糖含量,并比较2种血糖测定方法在鳝鱼血糖测定中是否存在差异,笔者于谷雨前对当地野生鳝鱼采用邻甲苯胺(o―TB)法和葡萄糖氧化酶(GOD)法测定其血糖含量。以期为在贵州地区开展鳝鱼养殖提供鳝鱼越冬至春季开食前生长情况及生化指标检测方法提供参考。 　　1材料与方法 　　1.1试验材料 　　试验用鳝鱼于4月下旬购自黔北市场。选择规格体长为20~40 cm、年龄为l~2年、基本上性成熟的健康的黄鳝作为试验对象。试验前将选择的黄鳝从泄殖孔后剪断尾部血管取血,血液样品制备按刘 金等[1]方法进行。本次测定采用非抗凝血离心分出的血清。 　　1.2邻甲苯胺法 　　1.2.1o―TB试剂。将1.5 g硫脲放于883.2 mL冰醋酸中,待充分溶解后加入76.8 mL邻甲苯胺混合,最后加入饱和硼酸溶液40 mL,并混匀置入棕色瓶内贮存备用。该试剂于24 h后使用。 　　1.2.2葡萄糖标准应用液。用量为5.0 mmoL/L。 　　1.2.3操作方法。按表1分别于测定管、标准管和空白管中加入相应试剂,混匀后置沸水浴中加热15 min后取出,立即于冷水中冷却5 min。以空白管调零,在波长620 nm处比色,读取标准管与测定管吸光度值。 　　1.2.4结果计算。血清葡萄糖浓度(mmoL/L)=(测定管吸光度值/标准管吸光度值)×5.0。 　　1.3葡萄糖氧化酶法 　　1.3.10.1 moL/L磷酸盐缓冲液(pH值7.0)的制备。将无水磷酸氢二钠8.67 g及无水磷酸二氢钾5.3 g溶于800 mL蒸馏水中,用1 moL/L氢氧化钠或盐酸调节pH值至7.0,然后用蒸馏水稀释至1 000 mL。 　　1.3.2酶试剂。称取葡萄糖氧化酶1 200 U,过氧化物酶1 200 U,4-氨基安替比林10 mg、叠氮钠100 mg,加上述磷酸盐缓冲液至80 mL左右,调节pH值至7.0,加磷酸盐缓冲液至100 mL,置冰箱保存。 　　1.3.3酚溶液。称取重蒸馏酚100 mg,溶于100 mL蒸馏水中,贮存于棕色瓶中。 　　1.3.4酶酚混合试剂。酶试剂及酚溶液等量混合,冰箱内4 ℃保存。 　　1.3.5葡萄糖标准应用液。用量为5.0 mmoL/L。 　　1.3.6操作方法。按表2分别于测定管、标准管和空白管中加入相应试剂,混匀后置37 ℃水浴中保温15 min后,在波长505 nm处比色,读取标准管与测定管吸光度值[2]。 　　1.3.7结果计算。血清葡萄糖浓度(mmoL/L)=(测定管吸光度值/标准管吸光度值)×5.0。 　　1.4数据处理 　　数据用SAS统计软件处理,数值用平均数±标准差表示,并表明相关统计学意义[3]。 　　2结果与分析 　　从表3中可以看出,贵州地区早春时节2种不同方法测定鳝鱼血糖含量均较低;经统计,2种方法测定血糖含量的差异不显著(P0.05)。邻甲苯胺(o―TB)法变异较大,均数较葡萄糖氧化酶(GOD)法偏高;葡萄糖氧化酶(GOD)法变异小,均数相对于前者偏低。 　　3结论与讨论 　　本试验研究测定的贵州地区早春时节野生鳝鱼血糖结果与已有报道相差较大,且远低于四川师范学院周 昂等[4]用Hagedorn-Jensen定糖法测定黄鳝血糖含量(7.526±1.565)mmoL/L及湖南师范大学刘金等[1]在测定正常鳝鱼血糖值5.06 mmoL/L。 　　黄鳝是变温动物,水温降到15 ℃时吃食明显减少;水温低于10 ℃则很少摄食;水温低于5 ℃则停止摄食。越冬期黄鳝基本上处于饥饿状态[5]。早春时节野生鳝鱼未开食即被捕获上市,且气温刚回升,鳝鱼天然饵料匮乏,长期饥饿可能是贵州地区野生鳝鱼血糖大幅降低的主要原因。有报道称某些鱼类饥饿7 d后血糖含量就下降