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二丁酰环磷腺苷钙有关物质分析与鉴定 　　摘 要 目的：建立反相高效液相色谱法（RP-HPLC）分析二丁酰环磷腺苷钙的有关物质，并对其中的杂质进行鉴定。方法：采用反相梯度色谱系统对二丁酰环磷腺苷钙中的有关杂质进行分离，对其中的主要杂质采用四级杆飞行时间质谱（Q-TOF）进行多级质谱分析，鉴定结构。并采用红外光谱、核磁进一步确证。结果：在该条件下，二丁酰环磷腺苷钙主峰与有关物质分离良好，其中的主要有关物质鉴定为2′-O-单丁酰环磷酰苷钙。结论：本研究为二丁酰环磷腺苷钙有关物质研究提供了新的分析方法，可用于二丁酰环磷腺苷钙的质量控制。 　　关键词 二丁酰环磷腺苷钙 有关物质 HPLC Q-TOF 　　中图分类号：R917 文献标志码：A 文章编号：1006-1533（2018）09-0073-04 　　Analysis and identification of the related impurities in the calcium dibutyryladenosine cyclophosphate 　　DING Jinguo*， JIA Cunyu， HUANG Zhenhui 　　（SPH No.1 Biochemical Pharmaceutical Co.， Ltd.， Shanghai 200240， China） 　　ABSTRACT Objective： To establish an HPLC method for the analysis and identification of related impurities in calcium dibutyryladenosine cyclophosphate. Methods： The related impurities were isolated by reversed-phase high-performance chromatography， in which the major impurities were identified by Q-TOF and verified by IR and NMR. Results： The related impurities were well separated and the major impurity was identified as 2′-O-butyryladenosine cyclophosphate. Conclusion： The established method for the analysis of the related impurities can be used for the quality control of calcium dibutyryladenosine cyclophosphate. 　　KEy WORDS calcium dibutyryladenosine cyclophosphate； related impurities； HPLC； Q-TOF 　　环磷腺苷具有体内激素的传导功能，对许多生理过程起着重要调节作用，如心肌细胞内环磷腺苷的升高会引起正性肌力效应，也作为药物用于心血管疾病治疗[1]。二丁酰环磷腺苷钙是环磷腺苷的N6-2′-O-二丁酰化衍生物，脂溶性增强，有利于穿过细胞膜进入细胞内发挥药理作用。二丁酰环磷腺苷在细胞内代谢为环磷腺苷，也能抑制磷酸二酯酶对环磷腺苷的快速降解，从而增加细胞内环磷腺苷浓度，药效比环磷腺苷迅速，作用也较持久，且具有更佳体内药物浓度分布和代谢动力学特性。临床上广泛用于心绞痛、急性心肌梗死的治疗，也用于心肌炎、心源性休克，手术后网膜下出血和银屑病，并可辅助其他抗癌药治疗白血病[2-6]。 　　本文建立了反相高效液相色谱法对二丁酰环磷腺苷钙中的有关物质进行分离，并对主要有关物质进行结构鉴定，为二丁酰环磷酰苷钙质量控制提供专属、快捷的分析方法，也为改进工艺控制、减少有关物质生成提供了研究基础。 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 　　色谱级甲酸铵购自美国Fluka公司；色谱级甲酸购自美国ROE公司；色谱级乙腈购自美国Fisher公司；二丁酰环磷酰苷钙为本公司自制产品；水为双蒸水。 　　1.2 仪器 　　Waters alliance 2695高效液相色谱仪、 Waters 2489 UV/ Vis检测器和Empower 2数据处理系统、Acquity UPLCQTOF Premier超高效液相色谱-质谱联用仪和Masslynx?稻荽?理系统均购自美国Waters公司；XS-205 DU电子天平（梅特勒-托利多中国公司）； Nicolet 6700傅里叶红外光谱分析仪（美国Thermo-Fish