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黄芪建中汤对脾虚型慢性萎缩性胃炎大鼠免疫功能影响
黄芪建中汤对脾虚型慢性萎缩性胃炎大鼠免疫功能影响
摘要 目的:观察脾虚型慢性萎缩性胃炎大鼠胃肠道功能的改变及黄芪建中汤对其的影响。方法:将24只Wistar大鼠随机分为4组:正常(C)组、慢性萎缩性胃炎(CAG)组、维酶素(V)组、黄芪建中汤(RA)组。并分别观察其对大鼠胸腺指数、脾指数、巨噬细胞吞噬功能、血清IgG和回肠粘液SIgA含量的影响。结果:与正常组比较,慢性萎缩性胃炎组大鼠的上述指标显著降低,经黄芪建中汤和维酶素治疗21天后,大鼠的上述改变有显著的改善。结论:从脾虚理论入手,用黄芪建中汤治疗慢性萎缩性胃炎,疗效显著。
关键词 黄芪建中汤 脾虚 慢性萎缩性胃炎 免疫功能 大鼠
现代医学认为,慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)的发病机制主要是在神经―分泌―免疫网络调控下出现的攻击和防护因子失调,尤其侧重于防护因子减弱。中医学则认为,本病属“胃脘痛”、“痞证”等范畴。本文从现代医学免疫学和中医脾虚理论入手,观察了CAG大鼠免疫功能状态的改变及黄芪建中汤对其的影响,现报告如下。
1 材料与方法
1.1 黄芪建中汤水煎剂及维酶素溶液的配制:见另文[1]。
1.2 主要实验仪器:800型离心沉淀器,上海手术器械十厂生产;XH-89型旋涡混合器,浙江乐城电器厂生产;721-型分光光度计,上海光谱仪器厂生产。
1.3 主要实验试剂:水杨酸钠,北京中联化工试剂厂生产;印度墨汁,北京市西中化工厂生产,批号:021106;兔抗大鼠IgG、IgA测定试剂盒,北京邦定泰克生物技术有限公司生产,批号:1552325。
1.4 实验方法:分述如下。
1.4.1 动物分组及CAG模型的复制[1]:将24只Wistar大鼠随机分为4组,正常组6只,余18只进行CAG造模。配置2%的水杨酸钠溶液,18只大鼠每日上午10时给药,给药前后各1h禁食、禁水,每日1次,每次每只灌药2.5ml;4周后,将造模大鼠放入温度为43±1℃的水槽中,让其自然游泳,当全组50%大鼠出现自然沉降时,全组大鼠停止游泳,每日1次,活动完毕后,大鼠行动迟缓,气喘吁吁,放入箱中,便聚于箱角;又4周后,单日禁食、禁水,双日足量喂食,自???饮水。8周后可造成大鼠脾虚型CAG病证结合的动物模型。维酶素(V)组:6只已造模的大鼠,使用维酶素治疗21d;黄芪建中汤(RA)组:6只已造模的大鼠,使用黄芪建中汤治疗21d。
1.4.2 取材与指标检测:参照文献[2-3]采用碳粒廓清法测定单核吞噬细胞系统吞噬功能:各组动物末次给药后禁食12h,自由饮水,实验前将印度墨汁3000r/min离心10min,取上清液用生理盐水稀释2倍备用。按大鼠体重,每1ml/100g经眼眶内眦静脉丛注射稀释的墨汁,注射完毕,立即记时,分别于2min(t?1)和12min(t?2)后用微量取血器分别从眼眶内眦静脉丛准确取血20μm,放入盛有2ml 0.1% Na?2CO?3溶液(0.1gNa?2CO?3加双蒸水至100ml,临用前配制)的比色管中,摇匀,用721-型分光光度计在650nm波长处测其OD值,分别记为OD?1和OD?2,并以0.1% Na?2CO?3溶液校正零点。
乙醚麻醉大鼠,无菌条件下在冰盘上打开胸腔,经心脏取血5ml,入不抗凝的试管,静置30min后,按3000r/min的速度离心10min,留取上层血清,放入尖底管中,-20℃保存。逐只脱颈椎处死大鼠,将腹腔打开,肉眼观察胃、肠、肝、脾的外部特征后,切取大鼠的肝脏、胸腺、脾脏,并用滤纸吸干表面的血液,用十万分之一电子天平称重。再将回肠沿长轴剖开,刮取回肠粘液,用2ml蒸馏水稀释,在低温条件下按3000r/min离心10min,取上清液,放入尖底管中,?-20℃保存待检。检测时,取血清和回肠粘液上清液,复融后按试剂盒说明以免疫比浊法测定血清IgG和回肠粘液SIgA。
按以下公式计算各项免疫指标:①脾指数=脾重量(g)÷大鼠体重(g)×100%;②胸腺指数=胸腺重量(g)÷大鼠体重(g)×100%;③廓清指数(K)=(LogOD?1-LogOD?2)/(t?2-t?1)=Log(OD?1/OD?2)/10;④吞噬指数(a)=K1/3#8226;体重/(肝重+脾重)。
1.5 统计学分析方法:将所有实验数据用Excel建立数据库,运用SPSS11.5 for windows统计软件包进行处理,计量资料所有数据均以x±s表示,组间样本均数差异的比较选用F检验,在F检验有统计学意义时,进一步用q检验进行两两比较,以α=0.05为检验水准。
2 结果
黄芪建中汤对CAG大鼠免疫功能,如
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