玫瑰花中苯丙素与苯乙醇类化合物研究.docVIP

玫瑰花中苯丙素与苯乙醇类化合物研究 　　[摘要]对产自陕西的玫瑰花的化学成分进行了研究，运用硅胶、凝胶、MCIGEL树脂及PRHPLC等多种色谱方法相结合从氯仿甲醇洗脱部分分离得到8个化合物，包括5个苯丙素类化合物（1～5）和3个苯乙醇类化合物（6～8）。化合物1为新化合物，且对NB4，SHSY5Y，PC3，A549和MCF7细胞株均表现出一定的细胞毒活性，其IC50分别为8.2，6.2，4.3，2.8，9.6μmol?L-1。 　　[关键词]玫瑰；苯丙素；苯乙醇；细胞毒活性 　　玫瑰RosarugosaThunb.为蔷薇科Rosaceae蔷薇属RosaL.植物，是多年生灌木[1]，在我国约有2000年的种植史，因其颜色艳丽，气味芳香，具有美化环境的功能，故多用于园林建设和提取玫瑰精油。玫瑰花富含氨基酸、蛋白质、多糖、淀粉、维生素等各种营养成分，花瓣可食用，可泡茶喝。此外，玫瑰花药用价值极高，历代本草均有玫瑰花在药用方面的记载，其具有清除自由基、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、扩张血管、解毒、利胆等作用[2]。国内外学者对玫瑰花化学成分进行过研究，发现其化学成分主要为丹宁类、萜类、苯丙素类和黄酮类化合物[36]。为了进一步明确不同地区玫瑰花的化学成分，以便对该药用植物的开发利用提供理论指导，本文对产自陕西汉中的玫瑰花进行了系统的化学成分研究，从中发现了5个苯丙素类化合物（1～5）和3个苯乙醇类化合物（6～8），其中化合物1为新化合物，且该化合物表现出一定的细胞毒活性。 　　1材料 　　UV2401A紫外光谱仪（日本岛津公司）；BioRadFTS185傅里叶变换红外光谱仪（美国伯乐BIORAD公司）；DRX500核磁共振仪（瑞士布鲁克公司）；半制备HPLC分析仪器为岛津LC8A型高效液相色谱仪，色谱柱为安捷伦公司ZORBAXSBC18（9.4mm×250mm，5μm）。 　　拌样时使用80～100目硅胶，柱色谱时使用200～300目硅胶，GF254（100mm×100mm）硅胶板，均为青岛海洋化工厂生产；反相填充材料RP18（40～63μm），Merk公司生产；MCI填充材料为MCIgelCHP20P（75～150μm）；凝胶为SephadexLH20；薄层色谱法显色，显色剂为5%H2SO4乙醇溶液，喷洒后适当加热即可；工业用三氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯、石油醚；色谱纯乙腈、四氢呋喃；超纯水。 　　玫瑰花干花样品购于云南省昆明市中药材批发市场，产地为陕西汉中，鉴定人为云南省昆明植物研究所周敏博士。样品粉碎到40目，供化学成分提取和分离用。 　　2提取分离 　　5.0kg陕西玫瑰花干花，粉碎到40目后用氯仿甲醇（2∶1）提取4次，每次用量为5L，室温浸泡、超声4次（每次30min），过滤，减压浓缩，合并得到浸膏650g。浸膏用980g（100～200目）粗硅胶拌样，烘干，然后经硅胶柱色谱，氯仿甲醇（1∶0，20∶1，10∶1，5∶1，2∶1，0∶1）梯度洗脱，分成6个部分。氯仿甲醇5∶1洗脱部分经MCI脱色后进行HPLC进一步分离：采用Agilent公司的ZORBAXSBC18（9.4mm×250mm，5μm）反相柱，以35%甲醇水溶液为流动相，体积流量为4mL?min-1，将此部分划分为A，B，C，D，E，F6个小部分。随后将各小部分用甲醇溶解，调节流动相比例A部分以40%甲醇为流动相，B，C，D部分以28%甲醇为流动相，利用HPLC分离、纯化，结果从A部分得化合物1（15.6mg），从B部分得化合物3（6.8mg），4（4.8mg），5（6.2mg），从C部分得化合物8（8.5mg），从D部分得化合物2（5.5mg），6（9.2mg），7（10.3mg），见图1。 　　3结构鉴定 　　化合物1浅黄色胶状物；HRESIMSm/z259.0589[M+Na]+（计算值259.0582，C12H12NaO5），结合1HNMR和DEPT谱确定其分子式为C12H12O5，不饱和度为7。红外光谱中显示了羟基（3454cm-1）、羰基（1736，1655cm-1）和芳环（1610，1532，1472cm-1）的共振吸收峰。而紫外光谱在315，284，212nm有最大吸收也说明了化合物中可能存在芳环结构。化合物的1H和13CNMR谱数据归属，见表1，显示其含有12个碳和11个氢的信号，分别为1组1，2，4，5四取代的苯环信号[δC121.4（C1），165.5（C2），112.8（C3），151.7（C4），116.5（C5），130.8（C6）；δH6.90（1H，s，H3），8.37（1H，s，H6）]、1组3羟基丙酰基信号[δC198.6（C7），43.1（C8），58.9（C9）；δH3.34（1H，t，J=6.8Hz，H