(二) 类囊体 类囊体膜:流动性高,内在蛋白有:细胞色素b6/f复合体、集光复合体(LHC)、质体醌(PQ)、质体蓝素(PC)、铁氧化还原蛋白(FD)、黄素蛋白、光系统I、II复合物。 基粒:扁平小囊堆叠而成,含40~60个。 基质类囊体:连接基粒的没有堆叠的类囊体。 (三)基质 内膜与类囊体之间的空间,主要成分包括: 碳同化相关的酶类:如RuBP羧化酶。 叶绿体DNA、蛋白质合成体系。 一些颗粒成分:如淀粉粒、质体小球和植物铁蛋白等。 二、光合磷酸化作用机理 光合作用分为光反应和暗反应; 光反应需要光,涉及水的光解和光合磷酸化; 暗反应不需要光,涉及CO2的固定,分为C3和C4两类。 (一)光合色素和电子传递链组分 1.光合色素 包括:叶绿素、类胡萝卜素,比例约3:1。 叶绿素分为a、b,比例约3:1。 -CHO in chl b 2.集光复合体 约200个叶绿素分子和一些肽链构成。 全部叶绿素b和大部分叶绿素a都是天线色素。 过程: O O H3CO H3CO CH3 R H3CO H3CO OH OH CH3 R +2H -2H 4.铁硫中心 非血红素铁和酸不稳定硫原子相结合 存在于NADH脱氢酶,琥珀酸脱氢酶 铁离子价态的变化可将氢从NADH脱氢酶复合物的FMNH2辅基上脱下转给辅酶Q。 NADH脱氢酶复合物也叫NADH-辅酶Q还原酶,复合物I,由两个电子传递结构,(酶原-FMN-铁硫中心) 铁硫中心 5.细胞色素类Cytochromes 细胞色素类以血红素为辅基,铁原子处于卟啉中心。 作用:单电子传递体, 将电子从辅酶Q传到氧。 细胞色素体系(Cyt) 30多种 Cyt的分类(吸收光谱) a类:a、a1、a2、 a3 … b类:b、b1~7、P450 … c类:c、c1、c2、 c3 … 细胞色素a a3以复合物的形式存在,传递e机制是以铁价的变化Fe3+ →Fe2+,a3还含有铜离子,把电子直接交给分子氧Cu+ →Cu2+,所以a3又称细胞色素氧化酶。 A3可与氰化物离子(CN—)、CO等结合 不同细胞色素的差异 区别: ① 铁卜啉辅基侧链不同 ② 铁卜啉辅基与酶蛋白连接方式不同 (三)两条主要的呼吸链 ①复合物I-III-IV组成,催化NADH的脱氢氧化。 ②复合物II-III-IV组成,催化琥珀酸的脱氢氧化。 对应于每个复合物Ⅰ,约需3个复合物Ⅲ,7个复合物Ⅳ,两个复合物之间由辅酶Q或细胞色素c这样的可扩散性分子连接。 Transport of electrons from NADH Transport of electrons from FADH2 三、氧化磷酸化的作用机理 (一)质子动力势 Mitchell(1961)提出“化学渗透假说”。认为: 电子沿呼吸链传递时,所释放的能量将质子从内膜基质侧(M侧)泵至膜间隙(C侧),形成质子动力势( △P)。 △P=Ψ-(2.3RT/F)△pH 其中:△pH= pH梯度, Ψ =电位梯度,T=绝对温度,R=气体常数,F为法拉第常数,当温度为25℃时△P的值为220mV左右。 Chemiosmotic Theory (二)ATP合酶(ATP synthase) F型质子泵;分为球形的F1(头部)和嵌入膜中的F0(基部)。 F1:α3β3γδε复合体,具有3个ATP合成的催化位点(每个β亚基1个)。 F0:ab2c12复合体,嵌入内膜,12个c亚基组成一个环形结构,具有质子通道。 ATP synthase 1979年Boyer提出构象耦联假说。其要点如下: 1.ATP酶利用质子动力势,催化ATP合成。 2.F1有3个催化位点,催化位点有3种构象。 3.质子通过F0时,引起c亚基构成的环旋转,带动γ亚基旋转,γ亚基端部高度不对称,引起β亚基3个催化位点构象的周期性变化(L、T、O),不断将ADP和Pi加合在一起,形成ATP。 支持构象耦联假说的实验: 吉田(Massasuke Yoshida)等 (三)P/O值 指每消耗一个氧原子所产生的ATP分子数,它表示氧化磷酸化的效率。 通常认为NADH/3,FADH2/2;也有人认为前者为2.5,后者为1.5。 (四)氧化磷酸化抑制剂 1.电子传递抑制剂 抑制复合物I,如阿米妥、鱼藤酮。 Amytal rotenone 抑制复合物II,如:2-噻吩甲酰三氟丙酮和萎锈灵。 2-Thenoyltrifluoroacetone carboxin 抑制复合物III,如抗霉素A 。 Antinomycin A 1 抑制复合物IV,如CO、CN、NaN3、H2S。 电子传递抑制剂可用来研究呼吸链各组分的排列顺序,当呼吸链某一特定部位被抑制后,底物一侧均为还原状态,氧一侧均为氧化态,可用分光光度计检测。 2.磷酸化抑制剂 与F0
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