固微生物农药资源之研发.PDF

這~2 01O 什nnuEI ! R~porl 固微生物農藥資源之研發 轉植與應用 | | 、 。 志 旦 ﹒ 微生物殺蟲殺菌基因之選殖及轉殖應用 (1) 4 株 含有 非 αyl 基 因 之 蘇 力 菌 subtiJis subsp . Subtilis 有99% 相似度 ; 驗 試 研 究 (Bacillus 的uringiensis) 菌株 ， PCR 進 另二與 Bacillus amyJoJiquefc1cien s FZB 行 cry3 、 7 、 8 型基因的確認， 結果顯 42 , complete genome 有99% 相似度 。 示含有 C1y8 型基因 (表 9. ) ，將 PCR (2) 本土光桿菌 Photorhabdus luminescens 的OS-PSG 以聚合臨連鎖反應 (PCR) 產物進行序列分析及比對 ，顯示前及 進行目標基因 prtA 之擴增 ，再將目 後半段序列分別與 Bacillus cereus 的 phosphohydrolase (MutT/nudix family 標基因片段與載體 pET29b接合 (圓 protein) 及dedA family protein 有98% 36 .) ， 轉型至大腸桿菌 Escheri chi a col i 及 99% 的同源性 ，但非為典型的 cly8 Rosetta 中 ， 再以IPTG 進行大量誘導 ， 型基因 。 2 株非典型 αy 型基因之蘇 可表現出 PrtA 目標蛋白約 53 kDa 力菌菌株， 其 600 bp PCR 產物經定序 經由核音酸序列轉譯分析後可