抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体的制备-湖南师范大学.PDFVIP

第２７卷第２期 激　光　生　物　学　报 Ｖｏｌ．２７Ｎｏ．２ 　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　 ２０１８年４月 ＡＣＴＡ　ＬＡＳＥＲ　ＢＩＯＬＯＧＹ　ＳＩＮＩＣＡ Ａｐｒ．２０１８ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００７７１４６．２０１８．０２．０１０  抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体的制备 ａ ｂ ａ ｃ ａ ａ ａ ｃ ａ 靳晓瑞 ，吴　意 ，廖晶 ，邱义兰 ，唐　娜 ，曾林秀 ，王　平 ，郭向荣 ，刘如石 （湖南师范大学，ａ．医学院；ｂ．第一附属医院；ｃ．生命科学学院，湖南长沙４１００１３） 摘　要： 目的：制备分泌特异性抗人甲状腺球蛋白（ｔｈｙｒｏｇｌｏｂｕｌｉｎ，Ｔｇ）单克隆抗体的杂交瘤细胞株，为建立高灵 敏度的Ｔｇ检测方法做准备。方法：以天然人源甲状腺球蛋白为抗原经皮下免疫 ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，通过细胞融合制 备分泌抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体，并对其进行特异性鉴定，建立检测Ｔｇ的双抗体ＥＬＩＳＡ（ｅｎｚｙｍｅｌｉｎｋｅｄｉｍ ｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙ）夹心法。结果：获得７株可稳定分泌抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，经 ＥＬＩＳＡ鉴定，筛选抗体可与Ｔｇ抗原有良好的特异性反应。建立的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ方法敏感性可达 １ｎｇ／ｍＬ。 结论：成功制备了抗人Ｔｇ单克隆抗体并建立了检测人Ｔｇ双抗体夹心ＥＬＩＳＡ方法，为进一步研发Ｔｇ快速诊断试 剂盒提供了原料。 关键词： 单克隆抗体；甲状腺球蛋白；纯化；酶联免疫吸附实验 中图分类号： Ｒ３９２ 文献标志码： Ａ 文章编号： １００７７１４６（２０１８）０２０１６６１０ ＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｙａｇａｉｎｓｔＨｕｍａｎＴｈｙｒｏｇｌｏｂｕｌｉｎ ａ ｂ ａ ｃ ａ ａ ＪＩＮＸｉａｏｒｕｉ，ＷＵＹｉ，ＬＩＡＯＭｉｎｊｉｎｇ，ＱＩＵＹｉｌａｎ，ＴＡＮＧＮａ，ＺＥＮＧＬｉｎｘｉｕ， ａ ｃ ａ ＷＡＮＰｉｎｇ，ＧＵＯＸｉａｎｇｒｏｎｇ ，ＬＩＵＲｕｓｈｉ （ＨｕｎａｎＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ａ．ＳｃｈｏｏｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ；ｂ．ＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌ； ｃ．ＳｃｈｏｏｌｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１００１３，Ｈｕｎａｎ，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｐｒｅｐａｒｅｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙａｇａｉｎｓｔｈｕｍａｎｔｈｙｒｏｇｌｏｂｕｌｉｎａｎｄｅｓｔａｂｌｉｓｈａｈｉｇｈｌｙｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｍｅｔ