益生芽孢杆菌脂肽类抑菌成分的高效液相色谱－电喷雾-动物营养学报.PDFVIP

动物营养学报２０１７，２９（４）：１１９１⁃１１９７ ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＡｎｉｍａｌＮｕｔｒｉｔｉｏｎ 　 ｄｏｉ：１０．３９６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１００６⁃２６７ｘ．２０１７．０４．０１４ 益生芽孢杆菌脂肽类抑菌成分的高效液 － 相色谱 电喷雾串联质谱分析 李红亚　 李术娜　 王树香　 王　 全　 李　 文　 朱宝成∗ （河北农业大学生命科学学院，保定 ０７１０００） 摘　 要： 本文旨在探明一株具有益生潜质的枯草芽孢杆菌Ｎ ⁃１０ 对肠道菌的抗菌作用及其活 ２ 性成分，为深入评价该菌株的益生功能和益生机理奠定基础。 以常见的肠道致病菌和有益菌为 － 指示菌，采用抑菌圈法对该菌株发酵液成分的抑菌活性进行测定，并通过高效液相色谱 电喷雾 串联质谱（ＨＰＬＣ⁃ＥＳＩ⁃ＭＳ／ ＭＳ）对其中的活性成分进行分析。 结果表明：枯草芽孢杆菌Ｎ ⁃１０ 发 ２ 酵液的氯仿和正丁醇提取液对供试菌无明显的抑制作用；脂肽类对大肠杆菌、痢疾杆菌和沙门 氏菌等肠道致病菌表现出明显的抑菌作用，而对肠道有益菌保加利亚乳杆菌抑制作用很弱，对 嗜热链球菌则无抑制作用。 脂肽粗提物的ＨＰＬＣ⁃ＥＳＩ⁃ＭＳ／ ＭＳ 分析结果显示，脂肽粗提物中的 脂肽类抗生素为伊枯草素家族中的Ｃ１４～Ｃ１７ 抗霉枯草菌素（Ｍｙｃｏｓｕｂｔｉｌｉｎ）的同系物。 因此推 断，枯草芽孢杆菌Ｎ ⁃１０ 对肠道致病菌产生抑制作用依赖于其产生的脂肽抗生素Ｍｙｃｏｓｕｂｔｉｌｉｎ。 ２ － 关键词： 枯草芽孢杆菌；脂肽类物质；抑菌作用；高效液相色谱 电喷雾串联质谱；抗霉枯草菌素 中图分类号：Ｓ８１１．６　 　 　 　 文献标识码：Ａ　 　 　 　 文章编号：１００６⁃２６７Ｘ（２０１７）０４⁃１１９１⁃０７ 　 　 芽孢杆菌作为益生菌的一种重要菌种资源， 不同，其中伊枯草菌素主要抑制真菌和部分细菌 具有抑制肠道致病菌、调节肠道菌群平衡、防治消 ［１３］ 生长 ，表面活性素不仅对革兰氏阳性菌、阴性菌 化道疾病以及提高机体免疫力等多重作用，在食 和霉菌等多种细菌、真菌有明显抑制作用，还对病 品、医药及饲料添加剂等领域发挥着重要作 ［１４］ 毒、支原体和原虫抑制效果显著 ，丰原素则主要 － ［１ ２］ ［１５］ 用 。 芽孢杆菌在其生长代谢过程中产生的抗 对丝状真菌有强烈的抑制作用 。 ［３］ 菌物质，是其发挥益生作用的重要物质基础 。 　 　 到目前为止，国内外对芽孢杆菌脂肽类抗菌 因此明确菌株的抑菌作用及抑菌成分，是研究其 物质的抑菌谱及应用研究主要侧重于真菌，尤