动物转基因研究中的技术方法.docx

生物技术通报·技术与方法· 生物技术通报 ·技术与方法· BIOTECHNOLOGY BULLE卯Ⅳ 10年第l2期 动物转基因研究中的技术方法 王凌云1 成功2 周欢敏1 (1内蒙古农业大学，呼和浩特010018；2中国农业大学，北京100193) 摘 要： 转基因动物研究的深入为生物学的发展起到了巨大的推动作用。转基因新技术的不断出现，推动了转基因动 物的发展。介绍了几种哺乳动物转基因研究中常见的方法，包括原核显微注射法、逆转录病毒感染法、胚胎干细胞介导法、生 殖细胞介导法、基因打靶以及新的比较有应用前景的方法，如Piggy Bac、iPS，锌指核酸酶法，并且分别对每种方法的优缺点进 行了总结归纳。 关键词： 转基因动物基因打靶转座子锌指核酸酶诱导多能干细胞 The Development of Transgenic Technology in Animals Wang Lingyunl Cheng Gon92 Zhou Huanminl (1InnerMongolia University，Huhhot Agricultural University，Beijing 100193) Abstract：Transgenic animal research plays important role in the development of biology，and of technologies promote the development of transgenic animals．This article reviewed several approaches used in animal research，such mi- eroinjection，retrovirus infection，embryonic，germinal cell，gene targeting，and methods，such Piggy Bac，iPS， ZFN．Several advantages and disadvantages of each method also summarized． Key words：Transgenic animal Gene targeting Transposon ZFN iPS 转基因动物是生物科学领域最有效、最令人振 究的方法。1980年，Gordon等采用这种方法首次成 奋的研究手段之一。随着重组DNA技术的迅猛发 功地将SV40启动子和疱疹病毒TK基因的融合基因 展，转基因动物技术的研究取得了一系列的进展与 进行受精卵原核注射，然后将注射后的受精卵移植于 成果。转基因动物技术自从诞生以来就在改良家畜 假孕的母鼠输卵管，成功得到了转基因小鼠，自此，这 生产性状、提高家畜抗病力以及生产人药用蛋白和 种技术开始被广泛的应用。1982年，Palmiter等构建 工业用酶等方面显示了广阔的应用前景，也成为了 了使用金属硫蛋白启动子驱动的大鼠生长激素基因 探讨基因调控机理、致癌基因作用和免疫系统反应 的表达载体，通过显微注射将此基因构件导入小鼠 的有力工具。同时，人类遗传病的转基因动物模型 受精卵，获得的转基因小鼠体重较正常小鼠几乎大 的建立，为遗传病的基因治疗打下坚实的理论基础。 一倍，被称为“超级小鼠”，其论文发表在《自然》杂 随着基因工程技术的不断发展，转基因动物技术将 志上，轰动了整个生命科学界，显示了利用转基因动 会不断得到完善，从而在未来的动物育种和药物蛋 物技术人为改造物种或生命性状的可能性。目前， 白的生产中发挥巨大的作用。现就介绍几种常见的 利用原核显微注射方法进行转基因仍然是小鼠的转 制作转基因动物所采用的技术。 基因试验中最常用的方法。原核显微注射方法在小 l原核显微注射方法 鼠的成功后马上应用到了大动物的转基因研究中， 原核显微注射方法是最早应用于转基因动物研 目前已有转基因猪、羊、牛等大动物的成功报道。但 收稿日期：2010—06一Ol 基金项目：内蒙古生物高科技项目 作者简介：王凌云，女，博士，主要从事发育生物学研究；E·mail：wanglingyunl981@126．eom 成功，男，博士，主要从事分子生物学研究；E-mail：c94455@gmail．corn 通讯作者：周欢敏，男，教授，博士生导师，主要从事遗传育种及干细胞方面研究；E—mail：huanminzhou@263．net 万方数据 74 74 生物技术通报