池蝶蚌铁蛋白基因特征和表达分析.pdfVIP

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2018-10-13 发布于江苏
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池蝶蚌铁蛋白基因特征和表达分析.pdf

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摘要摘要池蝶蚌(Hyriopsisschlegelii)原产于日本滋贺县琵琶湖，属软体动物门、瓣鳃纲、蚌科、帆蚌属，是一种优质的淡水育珠蚌。本研究从池蝶蚌中克隆得到 mRNA组织表达谱及在细菌诱导下主要组织中ferritin表达特征，原核表达重组蛋白，制备多克隆抗体。 1．从本实验室构建的嗜水气单胞菌诱导的池蝶蚌血细胞cDNA文库中获得编码ferritin的两条EST，运用SMART 和HQ841016。 2．Real．time PCR结果显示HsFer-1和HsFer．2mRNA在肝胰腺、性腺、斧足、肠、肾、心脏、鳃、闭壳肌、外套膜和血细胞中均有表达，在肝胰腺中表达量最高，其次为性腺、斧足和肠，在血细胞中表达量最低。 3．用嗜水气单胞菌诱导池蝶蚌，Real．timePCR结果显示细菌诱导显著上调 HsFer一1基因mRNA在肝胰腺、性腺和血细胞中的表达，其最高表达水平分别性腺中升高到4．87倍，而在肝胰腺和血细胞中分别下降至0．52倍和0．57倍。蛋白，制备多克隆抗体。Westernblot结果显示本研究成功获得anti．HsFer一1和 anti．HsFer-2的多克隆抗体。关键词：池蝶蚌，铁蛋白，基因克隆，荧光定量PCR，多克隆抗体 Abstract ABSTRACT wasintroduced Hyriopsis intoChinafromLake schlegelii，which Biwaof Japan in1 been 997，has in extensively forits disease applied pearl—producingindustryhigh resistanceandexcellentof the qualityproduced have pearl．In presentstudy，we identified twoferritinsubunitsfromH examinedthe schlegelii，furthermore，we tissue distributionofboth profiles ferritinsaswellastheir transcriptional regulation afterstimulationwith bacteriaAeromonas recombinant hydrophila．Theplasmids wereconstructed the antibodies usingpET-32a，then wer