高压氧与抗痫药对外伤性癫痫大鼠模型治疗的初步对比研究-临床医学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 摘要 目的： 本研究采用皮层注射氯化亚铁建立外伤性癫痫大鼠模型，从基因等层面上对比高压氧 （Hyperbaric Oxygen ，HBO）与一线抗癫痫药物丙戊酸钠（Valproate acid，VPA）对外伤 性癫痫（Posttraumatic epilepsy ，PTE）的防治作用，并探究其部分治疗机制。 方法： 1、健康成年雄性 SD 大鼠 16 只，通过皮层注射氯化亚铁法造模，采用随机数表法 将存活者分为 3 组：动物模型组、丙戊酸钠治疗组(VPA 治疗组)、高压氧治疗组（HBOT 组）。对所有动物模型进行常规治疗，丙戊酸钠治疗组予鼻饲丙戊酸钠，高压氧治疗组予 高压氧治疗。观察其行为学与脑电图改变。 2、30d 后处死动物，在冰上断头取脑，采用 HE 染色法观察大脑右侧海马神经细胞 损伤情况；运用 r-t PCR 法检测各样本早期快反应基因 c-fos mRNA、c-jun mRNA、c-myc mRNA 的表达水平。 3、用 SPSS 19.0 软件进行统计学分析。若方差齐，则采用单因素方差分析，组间均 数比较采用 LSD 检验；若方差不齐，则采用非参数检验的 Kruscal-Wallis 法，设定 P＜ 0.05 为差异有统计学意义。 结果： 1、造模情况：造模 16 只，成功 16 只，成功率 100%。 2、行为学表现：动物模型组动物出现癫痫典型的急性期，静止期及发作期表现；VPA 治疗组的癫痫发作频率及持续时间较动物模型组无明显减少；HBOT 组的发作频率及持续时 间较动物模型组明显减少。 3、脑电图表现：动物模型组大鼠表现出多种形式的癫痫样放电波。VPA 治疗组大鼠 癫痫发作次数无明显减少。而 HBOT 组癫痫样放电频率减慢和波幅降低，发作次数明显减 少。 4、病理学表现：动物模型组海马神经元缺失明显，出现典型细胞过度凋亡坏死及胶 质细胞增生；VPA 治疗组海马神经元缺失明显，神经元变性、死亡程度较重；HBOT 组神 经元变性、死亡程度较轻。 5、PCR 结果： 5.1 各组 c-fos mRNA 的表达水平：VPA 治疗组 c-fos mRNA 的表达水平较模型组显 著升高，差异有统计学意义（LSD 检验，P＜0.01），HBOT 组 c-fos mRNA 的表达水平较 VPA 治疗组明显下降，差异有统计学意义（LSD 检验，P＜0.05）。 、各组 c-jun mRNA 的表达水平：HBOT 组 c-jun mRNA 的表达水平较动物模型组 及 VPA 治疗组均明显下降，差异有统计学意义（K-W 检验，P＜0.05）。 各组 c-myc mRNA 的表达水平：HBOT 组及 VPA 治疗组 c-myc mRNA 的表达水平 较动物模型组显著下降（LSD 检验，P＜0.01）。 结论： 1、从行为学、EEG 及病理层面表现显示 HBOT 对 PTE 动物模型治疗作用较抗痫药佳。 2、 从基因层面我们可得出如下推断： 2.1 c-fos 基因作用层面分析：HBOT 可能通过降低 TBI 后脑皮质的高兴奋性，抑制 N- 甲基-D-天门冬氨酸（NMDA）受体激活及钙离子内流，使得神经细胞 c-fos 表达下调，从 而抑制外伤性癫痫发作。而 VPA 作用机制则与之相反，故推断其无法从本机制获益。 2.2 c-jun 基因作用层面分析：HBOT 可通过抑制 JNK 信号通路的激活，抑制神经元 过度凋亡及神经胶质细胞病理性增殖，从而达到抗 PTE 的效果。而 VPA 无法抑制 JNK 信 号通路的激活。 2.3 c-myc 基因作用层面分析：我们推测 HBOT 及 VPA 均可下调 c-myc 的表达，从而 抑制局部神经细胞的过度凋亡，最终抑制 PTE 发作。 3、HBOT 通过降低 TBI 后脑皮质的高兴奋性及抑制 JNK 信号通路的激活,以达到抗 PTE 的效果；而抗痫代表药 VPA 无法通过上述二机制作用而作用欠佳。 【关键词】：高压氧治疗；丙戊酸钠治疗；外伤性癫痫； Abstract Objective: Post-traumatic Epilepsy (PTE) Models were induced by intracortical injection of Fecl2 in rats. To compare the therapeutic effect of Hyperbaric Oxygen (HBO) and the first line anti-epileptic drug Valproic Acid (VPA) on PTE animal models genetically, and to investigate the partial mechanism of the