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小麦成熟胚愈伤组织诱导的研究进展 　　摘要：小麦品种的遗传改良一直倍受重视，利用小麦成熟胚为外植体进行愈伤组织培养越来越受到人们的关注。本文主要对影响小麦成熟胚愈伤组织诱导的诸多因素进行了讨论。 　　关键词：小麦；成熟胚；愈伤组织 　　中图分类号：Ｓ５１２．１；Ｑ８１３．１＋２文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）05－0884-02 　　 　　Advances in the Study on Callus Induction of Mature Embryos of Wheat 　　 　　ＧＵＯ Ｘｉａｏ－ｌｉ 　　（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ， Ｈｅｎｇｓｈｕｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｈｅｎｇｓｈｕｉ ０５３０００，Ｈｅｂｅｉ， Ｃｈｉｎａ） 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｇｅｎｅｔｉｃ ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ ｏｆ ｗｈｅａｔ ｈａｓ ａｔｔａｃｈｅｄ much attention． Ｍｏｒｅ ａｎｄ ｍｏｒｅ ｒｅｓｅａｒｃｈｅｒｓ were ｐａｙｉｎｇ ａｔｔｅｎｔｉｏｎ ｔｏ ｃａｌｌｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｍａｔｕｒｅ ｅｍｂｒｙｏｓ ｏｆ ｗｈｅａｔ． The ｆａｃｔｏｒｓ ｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇ ｔｈｅ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃａｌｌｕｓ ｗｅｒｅ ｄｉｓｃｕｓｓｅｄ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｗｈｅａｔ； ｍａｔｕｒｅ ｅｍｂｒｙｏ； ｃａｌｌｕｓ 　　 　　小麦是世界上最重要的粮食作物之一，在我国是仅次于水稻的第二大粮食作物，因而小麦品种的遗传改良一直倍受重视［１］。小麦成熟胚因其取材方便等优点而被人们用做外植体进行培养，以便在小麦品种改良和转基因研究中得到应用。目前，国际上仅有少数实验室的小麦遗传转化获得成功，主要原因是小麦离体再生比较困难，严重阻碍了小麦基因工程研究工作的进程。本文就小麦成熟胚愈伤组织诱导的影响因素进行了系统归纳，包括小麦生理状态、种子预处理、培养条件、培养基中激素种类、消毒剂种类等，以探索小麦成熟胚愈伤组织诱导的有效方法。 　　１小麦生理状态对愈伤组织诱导的影响 　　１．１不同基因型小麦成熟胚的愈伤组织诱导能力 　　在李新玲等［２］对东农７７４２、龙麦９８１４和龙麦２６这３个不同栽培品种小麦成熟胚进行离体培养的研究中表明，在相同培养条件下，不同基因型小麦成熟胚的愈伤组织诱导能力差别不大，出愈率均可达１００％。但有报道表明［３］，小麦不同基因型之间成熟胚愈伤组织的出愈率和愈伤组织质量都存在明显差异，这可能与选用基因型的数量和外植体的来源有关。另外，基因型的差异对小麦愈伤组织的分化有着重大的影响。这些可能是由于不同品种在启动愈伤组织形成及分化时，由于控制其形成和分化的基因以及基因组合不同，导致差异的显著。 　　１．２种子含水量和浸种时间对小麦成熟胚出愈率的影响 　　小麦成熟种子必须经过浸泡才容易剥离出胚，否则，胚容易受到伤害而降低出愈率。在李新玲等［２］的试验中，所用品种为东农７７４２、龙麦９８１４、龙麦２６，这３个品种种子含水量分别为１６．４％、１５．０％、１６．１％，浸种３６ ｈ后东农７７４２和龙麦２６胚乳较软，易剥离出胚，且出愈率达１００％。龙麦９８１４浸种３８ ｈ取胚较易。当３个小麦品种浸种时间超过４４ ｈ时，胚乳发黏，取胚困难。试验表明，不同的品种应采用不同的浸种时间。但对于大多数品种来说，当种子含水量在１５．０％～１６．５％、浸种时间在３６～４０ ｈ时易于取胚，并可提高出愈率。 　　２不同预处理对小麦成熟胚愈伤组织诱导的影响 　　２．１温度对出愈率的影响 　　廖祥儒等［４］采用低温处理小麦成熟胚，结果促进了成熟胚愈伤组织的形成，但与唐宗祥等［５］的研究结果不一致，唐宗祥等［５］认为，低温对成熟胚形成愈伤组织无太大影响，且室温和低温两种保存条件下成熟胚的出愈率没有显著差异。陈军营等［６］在低温条件下对１８个小麦品种成熟胚的愈伤组织形成影响的研究表明，低温处理对小麦成熟胚的愈伤组织形成无明显促进或抑制作用，但品种间差异较大，据分析，可能与试验材料和试验方法不尽相同有关，不过低温可促进早期收获的小麦成熟胚萌发。 　　２．２ＰＥＧ和ＣａＣｌ２对出愈率的影响 　　陈军营等［６］研究了ＰＥＧ、ＣａＣｌ２两种预处理对 　　１８个小麦品种成熟胚愈伤组织形成的影响，结果表明，ＰＥＧ对小麦成熟胚愈伤组织形成有积极的促进作用，是较理想的预处理方法。而ＣａＣｌ２处理对小麦成熟胚愈伤组织形成的影响与小麦品种有密切的关系，品种间差异较大。 　　２．３消毒剂对出愈率的影响 　　无菌条件是组织培养成败的关键，化学消毒剂的选择是至关重要的。目前我国实验室常用的灭菌消毒剂以升汞为主。但升汞对外