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广西人群白细胞介素31基因rC遗传多态性的研究 　　【摘要】 目的 了解白细胞介素31（IL31）基因单核苷酸多态性（SNP）各等位基因和基因型在广西地区人群中的分布频率，同时比较其在不同种族人群之间分布的差异。 　　方法 采用单碱基延伸的PCR技术（PCRSBE），对来自广西各地区的197例健康人群的IL31基因r/C多态性进行了检测，并将结果同人类基因组计划公布的欧洲人、非洲人、日本人和中国北京人等四个种族人群的SNP分型数据进行比较，分析不同种族人群的等位基因和基因型分布频率的差异。 　　结果 在中国广西地区人群中存在着IL31基因r/C多态性。其等位基因和基因型分布频率在男女组间比较差异均无统计学意义（P005），但该多态性位点等位基因和基因型的分布频率与非洲和日本人群比较，差异均有统计学意义（P005）。 　　结论 在中国广西人群中存在IL31基因多态性，且与性别不存在相关性，但与其他种族人群比较存在显著差异，这种差异可能导致一些疾病在不同种族间的发病率和临床表现存在显著不同。 　　【关键词】 IL31基因；单核苷酸多态性；种族 　　中图分类号：R446.11 文献标识码：A DOI：10.3969/j.issn2014.06.001 　　白细胞介素31（IL31）属于IL6细胞因子家族成员，主要由活化的Th2细胞产生，在活化的CD4+T细胞中有较高的表达，激活的CD8+T细胞仅有低水平表达，其通过介导其他细胞因子和炎症介质的表达，刺激成纤维细胞增殖，发挥促脏器炎症的作用，此外还具有调节细胞增殖分化、促进造血等多种生物学功能[1～3]。分子遗传学研究表明，IL31基因定位于12q24.31全长904 bp，开放阅读框495 bp，编码一条由164个氨基酸残基组成的多肽链。IL31存在着单核苷酸多态性且有关IL31基因多态性与非过敏性湿疹等多种疾病的研究国外已有文献报道[4]，但尚未见其在广西人群中的研究，而广西是壮族、汉族、瑶族、苗族、侗族等多个民族的聚居之地，研究IL31基因多态性在广西人群中的分布规律具有非常重要的意义。笔者采用单碱基延伸的PCR技术（PCRSBE）对来自广西地区的197例健康人群中IL31基因单核苷酸多态性（SNP）进行了研究，并将结果同人类基因组计划（Hapmap）公布的4个种族人群（欧洲人、非洲人、日本人和中国北京人）的SNP分型数据进行比较，以探讨在不同种族健康人群中基因多态性的分布差异，从而为人类学和群体遗传学等的研究奠定基础。 　　1 对象与方法 　　1.1 研究对象 　　随机选取在我院体检健康并且来自广西地区，相互间无血缘关系的个体197例，其中男116例，女81例；年龄25～84岁。所有对象的各项临床和实验室检查数据均在正常范围内。 　　1.2 方法 　　1.2.1 基因组DNA提取 　　用EDTAK2抗凝管采集以上对象的静脉血2 ml，白细胞基因组DNA的提取方法，参照已建立的改良碘化钠法[5]。 　　1.2.2 引物设计与合成 　　根据IL31基因rs 　/C位点多态性和已知的DNA序列用在线Primer3 软件（http：///cgi-bin/primer3/primer3www.cgi）设计PCR引物，引物合成由上海天昊生物科技有限公司来完成。用于r/C位点的上游引物序列为：5′ATCGTGCCTCTGCAATCTCAGG3′；下游引物序列为：5′AATTGCTTGA GCCCAGGAGACA3′；延伸引物序列为：5′TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTACAAGGATTTCAAGCAAT AACTCTGGA3′。 　　1.2.3 PCR扩增 　　IL31的PCR扩增反应体系共为20 μL，其中包含了10×PCR缓冲液2.0 μL，0.3 mmol/L dNTPs 2.0 μL，上游引物和下游引物各1.0 μL，模板DNA1.0 μL，TaqDNA聚合酶1.0 U，不足体积均用灭菌双蒸水补足至20 μL。PCR产物采用Qiagen公司的HotStarTaq进行多重PCR来获得，PCR产物通过虾碱酶（SAP，from Promega）和外切酶I（EXO I，from Epicentre）纯化后用ABI公司的SNaPshot Multiplex kit来进行延伸反应。延伸的产物用虾碱酶（SAP，from Promega）纯化后在ABI3730XL上样。用GeneMapper4.1（Appliedbiosystems）来分析SNP分型。 　　1.3 统计学方法 　　采用SPSS 11.5软件包进行统计分析。各等位基