肠杆菌科细菌耐药情况分析及对碳青霉烯类耐药机制研究-临床检验诊断学专业论文.docxVIP

华 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 PAGE 2 PAGE 2 肠杆菌科细菌耐药情况分析及对碳青霉烯类耐药机制研究 研究生：童先丽 导 师：孙自镛 中文摘要 目的 了解 2006~2009 年武汉同济医院临床分离的肠杆菌科细菌对常用抗菌药物的耐药 性，动态观察其耐药情况及变化趋势。从 β-内酰胺酶及外膜孔道蛋白(Out Membrane Protein，OMP)方面对 13 株对碳青霉烯类抗菌药物不敏感的肠杆菌科细菌的耐药机制 进行初步研究。并对临床资料进行回顾性研究分析，以了解肠杆菌科细菌对碳青霉烯 类耐药的重要危险因素。 方法 收集同济医院 2006～2009 年临床分离的非重复肠杆菌科细菌 6281 株。采用 K-B 法按统一方案进行抗菌药物敏感试验。按 CLSI2008 版判断结果。选取纸片扩散法亚 胺培南或美罗培南直径≤15mm 的菌株，采用琼脂稀释法和 E 试验条法检测其对常用 抗菌药物的 MIC 值。对碳青霉烯类抗菌药物不敏感的菌株采用表型试验的方法初步 筛选 ESBLs 酶、AmpC 酶及碳青霉烯水解酶。用 PCR 的方法检测其所携带的 β 内酰 胺酶及外膜孔道蛋白基因，并对临床资料进行回顾性研究。 结果 2006~2008 年，我院肠杆菌科细菌的产酶率呈上升趋势，2009 年略有下降。肠杆 菌科细菌儿童分离株的 ESBLs 检出率明显高于成人分离株。肠杆菌科细菌对头孢吡 肟、酶抑制剂复合制剂、氨基糖苷类和喹诺酮类敏感率较高，对碳青霉烯类保持高度 敏感。除变形杆菌属外，分离自 ICU 肠杆菌科细菌对几乎所有抗菌药物的敏感率均低 于分离自非 ICU 的菌株。发现 13 株对厄他培南不敏感的肠杆菌科细菌，其中有 8 株 （61.5%）来自儿童。13 株细菌中，有 12 株产 CTX-M 型 ESBL， 5 株产 SHV-11，6 株产 TEM-1，9 株携带 blaDHA 基因， 8 株携带 blaIMP-4 型金属 β 内酰胺酶基因。 金属酶的检出结果与改良 Hodge 试验结果一致。未检出 KPC 酶。13 株细菌中，有 6 株存在外膜孔道蛋白基因缺失的现象，其中有 3 株细菌 OmpK35 和 OmpK36 两种外 膜孔道蛋白基因同时缺失。通过对 13 株细菌临床分析发现，6 株存在外膜孔道蛋白基 因缺失的菌株中，除 2 株阴沟肠杆菌送检前患者未使用碳青霉烯类抗菌药物外，其它 4 株在送检前患者均使用过美罗培南 3 天以上。 结论 对肠杆菌科细菌的治疗，头孢吡肟、酶抑制剂复合制剂、氨基糖苷类和喹诺酮类 可作为临床经验治疗药物。碳青霉烯类抗菌药物是治疗危重患者感染的较佳选择。肠 杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药机制复杂。头孢菌素类的应用是产生碳青霉 烯类耐药的重要危险因素之一。碳青霉烯类药物的使用可以诱导外膜孔道蛋白基因缺 失，从而增加对碳青霉烯类抗菌药物的 MIC 值。应该重视本院细菌耐药性特点及耐 药菌感染的临床流行病学资料，从而给临床合理用药给予参考。 关键词： 肠杆菌；细菌耐药性；碳青霉烯类；耐药机制；金属酶；外膜孔道蛋白 Investigation on Resistant Mechanism of Carbapenems - insensitivity Enterobacteria Species Postgraduate: Tong Xianli Tutor : Sun Ziyong Abstract Objective To investigate the resistance of Enterobacteria isolates to antimicrobial agents commonly used in Tongji Hospital during 2006~2009. 13 carbapenems- insensitivity strains were analyzed to investigate the resistant mechanism of β-lactmases and out membrance protein. And the clinical datas were retrospectively analyzed to understand the important risk factors of resistance to carbapenems in Enterobacteriaceae species. Methods 6281 strains of Enterobacteriaceae species were collected from Tongji hospital during 2006 to 2009. Disk dif