超临界CO2萃取雨生红球藻中虾青素等有效成分的研究-应用化学专业论文.docxVIP

第二章 实验部分 19 2.1 原料与试剂 19 2.1.1 原料 19 2.1.2 试剂 19 2.2 超临界 CO2 流体萃取设备与分析检测仪器 20 2.2.1 超临界 CO2 流体萃取设备 20 2.2.2 分析检测仪器 20 2.3 实验方法 21 2.3.1 实验流程 21 2.3.2 超临界 CO2 流体萃取 21 2.3.3 皂化 24 2.3.4 类胡萝卜素吸光度及含量的测定 25 2.3.5 薄层层析分析 25 2.3.6 柱层析分离 25 2.3.7 有效成分的纯化 25 2.3.8 纯化产物的表征 26 第三章 结果与讨论 27 3.1 超临界 CO2 流体萃取虾青素的工艺条件优化 27 3.1.1 夹带剂的选择 27 3.1.2 温度的确定 31 3.1.3 压力的选定 34 3.2 萃取与纯化产物的表征 38 3.2.1 虾青素的表征 38 3.2.2 无色化合物Ⅰ的表征 40 第四章 结论 43 参 考 文 献 44 致 谢 50 PAGE PAGE 10 第一章 绪论 1.1 引言 虾青素，最开始被人们所认知是作为一种着色力很强的红色素。自然界中许多生 物有着美丽的红色外衣，鲑鱼通身诱人的亮红，龙虾煮熟后令人垂涎的大红，火烈鸟 引人侧目的粉红等等。赋予这些动物绚丽红色的就是虾青素[1]。 人们对虾青素最早的认识是在 20 世纪 30 年代。Karrer 等人早在 1932 年就从蟹 卵中提取出虾青素。但是由于当时科技不发达，设备不够先进，人们对虾青素的认知 仅仅局限于它可以作为一种单纯的色素。直到上个世纪 80 年代，随着科学技术的不 断发展，科学设备的不断更新，科学手段的不断丰富，人们才对虾青素的生物学功能 进行了广泛的研究。 风靡全球的安利纽崔莱 β-胡萝卜素，在 2003 年国内销售额就已经超过 10 亿元。 该产品之所以得到世人的追捧，就是因为 β-胡萝卜素具有显著的抗氧化能力，即抗 衰老能力，这一点正迎合了人们渴望延缓衰老的需求。而天然虾青素的抗氧化能力是 天然 β-胡萝卜素的 10 倍，那么可以推断出：对于长期食用天然虾青素的人们，青春 永驻将不再是神话。 野生三文鱼中也富含着天然的虾青素。美国著名皮肤美容学家佩里肯教授曾经在 《泰晤士报》发表一篇“怎样让你年轻十岁”的文章，并在其中极力推荐食用野生三 文鱼，就是因为其中独特的天然虾青素有显著的抗衰除皱作用。 据报道，目前抗氧化剂的市场需求已经近每年 30 亿美元，并在逐年增加。权威 人士预言“如果说 20 世纪是维生素的世纪，那么 21 世纪将是抗氧化剂的世纪”。而 天然虾青素是迄今为止自然界中发现的最强的抗氧化剂。并且由于天然虾青素在自然 界中含量很低，也使得其市场价格始终居高不下，目前纯天然虾青素国际市场价格已 达 3500 美元/公斤以上。因此，全世界范围内兴起了一片提取天然虾青素的热潮。 目前天然虾青素的来源主要包括甲壳类动物的壳、红法夫酵母菌以及雨生红球 藻。然而虾壳油提取物和红法夫酵母中虾青素含量都很低，仅为 0.15%和 0.4%。相 比之下，雨生红球藻中虾青素含量相对高些，约为 1.5～3.0%。因此，雨生红球藻被 认为是天然虾青素最富集的形式。 人们找到了最佳富集形式之后，又在努力探索新的提取工艺，以期达到安全、快 速、高效、无污染等适应社会发展并且对人体零伤害的需要。 超临界流体萃取（supercritical fluid extraction，缩写 SCFE 或 SFE）是一种新型 的提取分离技术。它即可改善提取虾青素工艺流程的需要，又是可提高提取率的有效 节能减排的分离方法。 本文对超临界 CO2 流体技术从雨生红球藻中提取虾青素的工艺等做了初步的探 讨。 1.2 雨生红球藻简介 雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)亦称血球藻，是一种单细胞绿藻，在分类学 上隶属于绿藻门(Chlorophata)、绿藻纲(Chlorophyceae)、团藻目(Volvocales)、红球 藻科(Haematococcaceae)、红球藻属(Haeematococcus)。 图 1-1 雨生红球藻 Fig. 1-1 Haematococcus pluvialis 雨生红球藻的细胞壁由纤维素和果胶质分内外两层组成，胶样的物质填满了细胞 壁和细胞质之间的空隙，细胞质连丝连接着细胞壁和原生质体。原生质体为卵形，前 端乳头突起不与细胞壁连结，成熟的细胞乳头状突起常不明显。游动细胞具有 2 条(少 数 4 条)顶生、等长、约等于体长的鞭毛，通过前端的叉状胶质伸出细胞壁。细胞核 位于中央位置，有明显的核膜和核仁。伸缩泡有数个至数十个不等，并且