茶树抗寒性生理指标的筛选及抗寒性鉴定方法的建立-遗传学专业论文.docxVIP

I I 摘要 本研究分别在人工低温条件下和自然低温条件下，对舒茶早和乌牛早两个茶 树品种叶片相对电导率、丙二醛含量、可溶性糖含量和脯氨酸含量 4 项生理指标 进行了测定，通过比较分析各项指标随温度的变化规律，发现无论在人工低温条 件下，还是在自然越冬过程中，可溶性糖含量的变化与温度变化存在高度负相关 性，即随着温度的降低，可溶性糖含量呈现显著而单一的增加趋势，具有较好的 变化规律。因此，茶树叶片可溶性糖含量相对其他 3 项生理指标来说，能更好的 反应低温胁迫下茶树抗寒性生理的变化。 为了进一步了解低温条件下，可溶性糖含量积累的规律性，本研究利用 HPLC 技术，对越冬期舒茶早和乌牛早两个茶树品种叶片可溶性糖成分进行了具体的分 析，并比较了各种糖成分动态变化的规律，发现蔗糖在茶树叶片可溶性糖成分中 占据主导地位，其含量变化与月平均气温存在高度负相关，随着外界气温的降低， 蔗糖含量呈现显著的增加趋势，并且舒茶早和乌牛早增加的幅度具有较大差异， 生 产 实 践 中 抗 寒 性较 强 的 舒 茶 早， 蔗 糖 含量 从 23.13mg/g （ 干 重 ） 上升 到 137.03mg/g（干重），增加了近 5 倍，生产中抗寒性较弱的茶树品种乌牛早蔗糖 含量从 42.46mg/g（干重）上升到 112.14mg/g（干重），增加了约 2 倍。另外， 在低温的月份（12 月、1 月和 2 月），舒茶早蔗糖含量水平均显著高于乌牛早。 在此结论的基础上，本研究旨在为建立一种通过测定和比较低温条件下不同品种 茶树叶片中蔗糖含量来鉴定茶树抗寒性的方法提供理论依据，该方法可能比传统 的测定可溶性总糖的方法更加科学、可靠。 在证实茶树叶片蔗糖含量积累与其抗寒性有着密切关系之后，对调控蔗糖合 成的关键酶—蔗糖磷酸合成酶（SPS）及其编码基因的研究将有助于进一步从分 子水平上研究糖积累及糖代谢过程与茶树抗寒性的关系。本研究对茶树叶片 SPS 基因进行了全长克隆，得到其全长序列为 3635bp，含有 3108bp 的开放阅读框， 编码 1036 个氨基酸，其氨基酸序列与烟草、咖啡、碧桃、甜瓜、马铃薯、番茄 的同源性均在 80%以上，命名为 CsSPS。这将为后续研究低温条件下 CsSPS 的表 达与调控提供必要的参考。 关键词：茶树，低温胁迫，抗寒性生理，可溶性糖成分，HPLC，克隆，蔗糖磷酸 合成酶 I II Abstract In this study，we detected 4 physiological indexes that included the Relative Electric Conductivity(REC), MDA content, soluble sugar content and proline content in leaves of Shuchazao and Wuniuzao under artificial low temperature conditions and natural low temperature conditions. The result showed that there was a high negative correlation between the change of soluble sugar content and the change of temperature either in artificial low temperature conditions or in natural low temperature conditions by comparing and analysing the regularity of changes of the four indexes with the temperature. As the temperature fell, the soluble sugar content showed a significant and single increasing trend, which had a good regularity of change. So compared with other indexes, the soluble sugar content in leaves of Camellia sinensis can better reflect the physiological change of Camellia sinensis under cold stress. To further understand the regularity of the accumulation of