藏药复方新三果汤防治HAPC藏医多血症药效及作用机制研究-中药药理学专业论文.docx

PAGE PAGE 5 中文摘要 目的 在藏医药理论体系的指导下，结合系统生物学的思路和现代分子生物学的方 法，观察藏药复方新三果汤抗疲劳、抗缺氧及防治慢性缺氧导致的高原红细胞增 多症动物模型的作用及机制，尝试建立民族医药防治慢性高原病的有效性评价和 作用机制研究的新方法，为寻找防治高原红细胞增多症的新途径提供一定实验依 据。 方法 (1)取昆明种小鼠50只，随机分为空白组、红景天组、三勒浆组、新三果汤 高剂量组、低剂量组。每天按0.2 ml/10g容积灌胃给药，连续10 d。末次灌胃1 h后，于小鼠尾根部约2 cm处按体重5%负荷铅丝，置水游泳，注意观察，当小 鼠头部沉入水中10 s不能浮出水面者即为体力耗竭。记录小鼠放入玻璃缸中游 泳至小鼠体力耗竭的时间，作为负重游泳时间。观察新三果汤抗疲劳作用。 (2)取昆明种小鼠50只，随机分为5组，分别为空白组、红景天组、三勒浆组、 新三果汤高剂量组、低剂量组，每组10只。按0.2 ml/10g灌胃给药每天1次，连 续10 d。空白组给予等容量的生理盐水。末次灌胃1 h后，将小鼠放入盛有10 g 钠石灰的250 ml广口瓶内，每次每组放一只，用凡士林涂抹瓶口盖严，使之不漏 气，立即计时。小鼠从缺氧到死亡过程中有紫绀和抽搐症状，以小鼠挣扎抽搐后 突然瘫软并呼吸停止为死亡判定标准，观察新三果汤抗缺氧作用。 (3)将雄性SD大鼠50只，分为平原组、高原模型组、红景天组、新三果汤高 剂量+慢性缺氧组、新三果汤低剂量+慢性缺氧组。大鼠在5 000 m高原环境模拟 舱中，缺氧40 d(22 h/d),以建立红细胞增多症模型。观察新三果汤防治慢性高原 病的有效性和作用机制。 (4)采用高效液相色谱法测定新三果汤中各药材和复方的主要药物成分，建 立新三果汤中红景天苷、没食子酸、芦丁、单宁酸测定方法。色谱条件: 色谱柱 为 Agilent XDB C18 （5 μm，4.6×250mm），甲醇：5mmol 甲酸铵/0.1%甲酸 梯度洗脱，流速 1.00 ml/min，进样量 10 μL，柱温 25℃，检测波长 275nm。 结果 (1)红景天、新三果汤高剂量可明显延长小鼠平均游泳时间，与空白对照组 相比较，分别延长了94.0％、54.8％（P﹤0.01或P﹤0.05）。 (2)新三果汤高剂量可明显增强小鼠耐常压缺氧能力，与空白对照组相比较， 延长了19.6%（P﹤0.05）。 (3)高原模型组大鼠的红细胞数、血红蛋白和红细胞压积增高，pH值、动脉 血氧分压、血氧饱和度、二氧化碳分压降低，高、中、低切全血黏度、血浆黏度 增高，血清EPO含量增加，证明模型动物复制成功；与高原模型组相比，新三 果汤高、低剂量组大鼠的红细胞数、血红蛋白和红细胞压积值均明显下降，高、 中、低切全血黏度、血浆黏度降低，pH值、动脉血氧分压、血氧饱和度、二氧 化碳分压升高，且高剂量组较低剂量组作用明显；同时可以降低缺氧大鼠血清促 红细胞生成素含量。 (4)新三果汤能够提高高原模型大鼠超氧化物歧化酶含量，降低丙二醛水平， 具有良好的抗氧化作用；同时能够下调对还是缺氧最为敏感的肾脏活性氧活性， 抑制脑组织中缺氧诱导因子-1α 蛋白表达，同时使肾脏组织中促红细胞生成素和 血管生长因子 mRNA 表达降低，引起血清促红细胞生成素含量下降，抑制外周 血象中红系增生，达到治疗高原红细胞增多症的效果；新三果汤还能减轻肾脏由 于缺氧引起的超微病理学改变，具有保护肾脏作用。 (5)新三果汤中主要含有红景天苷、没食子酸、芦丁、单宁酸a、b、c等成分。 结论 本文证实了新三果汤具有较好的抗疲劳、抗缺氧作用，能够防治由于高原缺 氧导致的红细胞增多症，其作用机制可能与作用于“活性氧—缺氧诱导因子-1α— 促红细胞生成素通路”有关。 关键词： 三果汤；高原红细胞增多症；缺氧；有效性；作用机制；缺氧诱导因子 Objective： Abstract To observe the effects of Xin-San-Guo-Tang on rats with chronical hypoxia which was induced by polycythemia，according to Tibetan medicine theory ,as well as systems biology and modern molecular biology methods. We attempt to establish an efficiency evaluation and a new method for mechanism study of Tibetan medicine on preventing and treating of chronic moun