多发性骨髓瘤来源微泡抑制BMSCs成骨分化促进疾病进展的体内效应研究-内科学(血液病学)专业论文.docxVIP

华中科技大学硕士学位论文 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 万方数据 万方数据 英文缩略词表 英文缩写 英文名称 中文名称 MM MV BMSCs OPG TMV Multiple myeloma Microvesicle Bone marrow stromal stem cells Osteoprotegerin Tumor microparticles 多发性骨髓瘤 微泡 骨髓间充质干细胞 骨保护素 肿瘤来源微粒 FBS Fetal bovine serum 胎牛血清 RANKL Receptor Activator for- 核因子 κB 受体- HE Nuclear Factor-κB Ligand hematoxylin-eosin staining 活化因子配体 苏木精 -伊红染色 TRAP IHC OB OC OB D BAFF Tartrate-resistant acid phosphatase Immunohistochemistry Osteoblast Osteoclast Osteolytic bone disease B-cell activating factor 抗酒石酸酸性磷酸酶 免疫组织化学 成骨细胞 破骨细胞 溶骨性骨病 B 细胞活化因子 CCR-I Chemokine receptor for MIP1α-1 MIP1α-1 趋化因子受体 TGF-β AKI mRNA microRNA OAF OIF Transforming growth factor-β Acute kidney injury Messenger RNA MicroRibonucleic acid Osteoclast activating factor Osteogenic inhibitory factor 转化生长因子-β 急性肾损伤 信使 RNA 微小 RNA 破骨细胞活化因子 成骨抑制因子 1 MIP-1α Macrophage inflammatory protein-α 巨噬细胞炎性蛋白-1α TNF-α Tumor Necrosis Factor α 肿瘤坏死因子-α HGF Hepatocyte Growth Factor 肝细胞生长因子 IL- 6 Interleukin-6 白细胞介素-6 IL- 7 Interleukin-7 白细胞介素-7 IL- 11 Interleukin-11 白细胞介素-11 SDF-1α Stromal derived chemokine α 基质趋化因子-lα FGF Fibroblast growth factor 碱性成纤维细胞生长因子 VEGF Vascular endothelial growth factor 血管内皮生长因子 SPF specific pathogen free 无特定病原体级 2 MM-MV 抑制 BMSCs 成骨分化促进疾病进展的体内效应研究 硕士研究生：续翠微 导 师：陈智超 教授 摘 要 目的：课题组前期体外实验首次明确 MM-MV 的存在特征以及证实 MM-MV 能 显著抑制 BMSCs 的成骨分化能力。本研究旨在 MM 鼠模型中明确 MM-MV 的 分布特征和探讨 MM-MV 抑制 BMSCs 成骨分化的效应，以进一步明确 MM-MV 的生物特性和为临床研究提供思路。 方法：前期实验证实多发性骨髓瘤细胞系 RPMI8226 来源微泡抑制 BMSC 成骨 分化能力明显强于 U266 细和 KM3 来源微泡，因此体内实验主要以 RPMI8226 细胞系为研究对象。实验鼠以 Balb/c-nu 鼠为研究对象，通过将 RPMI8226 细胞 直接注入鼠胫骨骨髓腔而建立 MM 鼠模型，注入 MM-MV 后观察小鼠的生存情 况；利用共聚焦显微镜观察 PKH-26 标记的 MM-MV 在鼠体内的分布特征；采用 microCT 扫描检测胫骨的骨质破坏情况，并进行相关的骨定量分析；利用 HE 染 色、TRAP 染色和 Gomori’s trichrome 染色进行形态学检测，以观察 MM 细胞的 增殖能力、骨质破坏情况及进行骨细胞和破骨细胞的定量分析；通过 IHC 于分 子水平检测骨髓微环境中 CD138 和 Osteocalcin 的表达水平。 结果：在本实验成功构建的 MM 鼠模型中证实 MM-MV 可明显促进 MM 的骨质 破坏作用。MM-MV 体内示踪实验证实 MM-MV 在鼠体内随时间呈动态分布的 过程，且其分布具有器官异质性。观察各组鼠的生存期发现 control 组单位时间 内死亡率 0%；MV 组单位时间内死亡率 47%；MM 组单位时间内死亡率 100%， 中位生存时间为 33.0 天；MM+MM-MV 组单