草鱼免疫器官个体发育的组织结构和免疫细胞变化-临床兽医学专业论文.docxVIP

上海海 上海海洋大学硕士学位论文 II II 圆体及毛细血管，脾髓中有较多黑色素巨噬细胞中心，无淋巴小结， 无明显的红髓和白髓区分；在脾脏间质中有胰脏组织。运用 PAS（过 碘酸雪夫氏染色）、SP（抗生物素蛋白-过氧化酶）免疫组化等研究进 一步表明，IgM 和 PAS 阳性细胞阳性细胞数量由多到少依次为：头肾、 脾脏、体肾、胸腺；IgZ 阳性细胞细胞数量由多到少依次为头肾、胸腺、 体肾、脾脏。 应用常规石蜡切片及 HE 染色研究了草鱼初孵仔鱼至 103dph(出膜 后日龄)幼鱼的免疫器官：肾脏（头肾和体肾）、胸腺、脾脏的发育。结 果表明，免疫器官原基出现的先后顺序是胸腺（4dph）、头肾（6dph） 和脾脏（6dph）。免疫器官出现小淋巴细胞顺序是胸腺（6dph）、头肾(7dph) 和脾脏(7dph)。草鱼胸腺在 19dph 已形成类似哺乳动物胸腺的皮质和髓 质的结构，随着发育胸腺分化出胸腺小叶。草鱼肾脏的发育大体上分 两个阶段：前肾期；头肾和中肾期；草鱼肾脏从前肾朝头肾和中肾两 个不同的方向发育，头肾逐渐发育为具有免疫组织及肾上腺组织的混 合型器官，中肾形成比前肾更先进的泌尿结构伴随拟淋巴组织的增殖。 脾脏发育伴随着胰腺组织由外围包裹逐渐深入脾脏结缔组织间的过 程。间充质细胞及造血干细胞逐渐分化由血细胞特别是红细胞及血管 系统组成的脾脏，脾脏再分化出大量的脾小叶结构。75dph 左右，各免 疫器官已具有基本完整的组织结构。 利用 SP 免疫组学技术检测到 IgM 阳性细胞首先在 17dph 出现在草 鱼头肾、体肾和脾脏中检测到，在胸腺中 IgM 阳性细胞出现的比较晚， III III 大约 65dph 开始出现；IgZ 阳性细胞（18dph）最早在草鱼的体肾拟淋 巴组织中的分布；随后出现在脾（25dph）、头肾（27dph）和胸腺 （103dph）。阿利新蓝-过碘酸雪夫氏染色染色(AB-PAS)的 PAS 阳性细 胞出现时间如下：脾脏（6dph），头肾和体肾（7dph）及胸腺（11dph）， 其不同器官同日龄数量由多到少为头肾、体肾、脾脏、胸腺。 总之，依据免疫器官的组织结构及阳性细胞的分布情况及草鱼免 疫器官早期发育可以分为四个阶段：1-5dph，未见免疫相关细胞； 6-16dph，具有参与非特异性免疫反应的细胞基础；17dph-75dph，不但 具有非特异性免疫反应细胞而且具有参与特异性免疫反应的细胞基 础，两者共同增殖；75dph 以后，免疫系统的组织结构发育基本完全并 继续完善，免疫细胞继续成熟分化。 关键词：草鱼，IgM 阳性细胞，免疫器官，IgZ 阳性细胞，PAS 阳性细 胞，个体发育 PAGE PAGE VI Microstructure and immune cells’distribution of early development immune organs in Ctenopharyngodon idellus ABSTRACT Grass carp (Ctenopharyngodon idellus) as an important species in aquaculture industry of China, was threatened seriously by many kinds of diseases such as the hermorrage disease, gill rot disease and red skin disease in recent years. It is thus important and necessary to understand its immune system, and also crucial to take measures to prevention these diseases. The present study aims to claim the structures and ontogeny of the immune organs, and expression changes of IgM, IgZ and PAS (periodic acid schiff) positive cells in the development lymphoid organ of grass carp. Firstly, by HE（hematoxylin-eosin）staining, this paper studied the structure of the immune organ of grass carp, including kidney (head kidney and mesonephros), thym