果蔬中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速测定的方法.docVIP

果蔬中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速测定的方法 　　摘要 介绍了果蔬中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速测定方法的原理、设备、方法、结果判定及注意事项，并系统阐述了快速测定方法的优点、缺点，以供参考。 　　关键词 果蔬；有机磷；氨基甲酸酯；农药残留；快速测定方法 　　中图分类号 S6；S481+.8 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2012）03-0211-01 　　随着人民生活水平的提高、健康意识的增强，果蔬的质量安全问题已成为社会各界普遍关注的大事。各级政府对果蔬的监管措施也在不断强化[1-2]。由于传统的检测技术检测时间长、成本高、对检测人员专业性要求高而不适于对果蔬进行有效的产前、产中、产后的监督管理[3-4]。因此，用时少、成本低、易操作的快速测定方法发展前景广阔。本文介绍了果蔬中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速检测技术，根据有机磷及氨基甲酸酯类农药能抑制乙酰胆碱酯酶活性，从而导致加入底物后颜色发生不同程度变化的原理，通过测出吸光度变化值，进而计算出抑制率的方法来判断果蔬中有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留情况。 　　1 检测原理与方法 　　1.1 检测原理 　　有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酶的活性，造成神经传导介质乙酰胆碱的积累，影响正常传导，使昆虫中毒致死。根据这一昆虫毒理学原理，将其用于农药残留的检测中[5-7]。如果蔬菜的提取液中不含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留或残留量较低，酶的活性就不被抑制，反之，如果蔬菜的提取液中含有一定量的有机磷或氨基甲酸酯类农药，酶的活性就被抑制，再用农药残留快速检测仪测定吸光值随时间的变化，计算出抑制率，便可判断出蔬菜中含有机磷或氨基甲酸类酯农药的残留情况。 　　1.2 检测设备及试剂 　　检测设备为RP-410农药残留快速检测仪、电子天平（精确到0.1 g）、台式培养箱。试剂：pH值为8的磷酸缓冲液、丁酰胆碱酯酶、底物（碘化硫代丁酰胆碱）、显色剂（二硫代二硝基苯甲酸），酶、底物及显色剂均用缓冲液溶解。 　　1.3 检测方法 　　样品处理：选取有代表性的样品，擦去泥土，并剪成1 cm2的小碎片。称取2 g（非叶菜类称取4 g），加入20 mL缓冲液，振荡1～2 min，静置3～5 min，于小试管内加入50 μL酶、3 mL样本提取液、50 μL显色剂，于37～38 ℃下的恒温培养箱中放置15 min后再分别加入50 μL底物，摇匀后立即倒入比色皿中上机测定3 min，根据吸光度值计算出ΔA或根据直接显示的抑制率即可得出是否含有有机磷或氨基甲酸酯类农药。 　　1.4 检测结果判定 　　检测结果按以下公式计算： 　　抑制率（%）=■×100（1） 　　式（1）中：ΔAc为对照组3 min后与3 min前吸光度之差；ΔAs为样品3 min后与3 min前吸光度之差。 　　抑制率≥70%时，蔬菜中含有某种或某几种有机磷或氨基甲酸酯类农药残毒，此时样品要做3次以上重复检测，且重现性应大于80%。 　　2 检测注意事项 　　一是空白对照实验的初始吸光度值应在0.1～0.3，3 min后应在0.6～0.9，表明显色剂、底物的有效性和可用性；ΔA的值应在0.3～0.8，说明酶具有良好的活性，可以用于测定。二是质量控制。将60 μL浓度为5 mg/L的敌敌畏标准溶液加至3 mL缓冲液中，同样方法测得的抑制率应在97%～103%，说明实验设备、试剂与条件良好，可以检测。三是加底物和上机的过程要尽量快速，保证ΔA值的准确；样品放置时间要与空白样品严格保持一致。 　　３ 快速测定方法的优缺点 　　3.1 优点 　　一是快速。样本无需净化，检测全过程只需30 min。二是涵盖范围广。可以同时检测样品中有机磷与氨基甲酸酯类农药残留，无需单一农药标准品[8]。三是简便。实验操作简单，容易掌握。四是经济。该技术对仪器设备、实验条件及所用试剂的要求均不高，且成本低廉。 　　3.2 缺点 　　一是酶试剂易失去活性，导致反应不稳定，检测结果误差较大，重复性不好。二是存在检测盲区，只能检测有机磷及氨基甲酸酯类农药，对有机氯及菊酯类等其他种类农药不能进行检测[9]。三是检出时，不能确认为何种农药残留。四是方法的检出限相对较高，对甲基对硫磷、乐果、毒死蜱、二嗪磷等农药不太灵敏，检出浓度均在10 mg/kg以上。五是不适宜检测葱蒜、韭菜、香菜等易产生假阳性的农产品。 　　4 结语 　　尽管快速测定方法还存在着不尽如人意的缺点，但是其在保障农产品安全过程中仍是功不可没，起着不可取代的作用。快速测定方法与大型仪器设备检测相结合，在最大 　　程度上保证了百姓的餐桌安全[10-11]。多年来，沈阳市农业检测中心不断强化对上市蔬菜、水果等